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目的近年来我国甲状腺癌（TC）的发病率明显升高,尤其以甲状腺微小乳头状癌（PTMC）发病率增高最为显著,而且伴有被膜侵袭和/或颈部淋巴结转移的微小乳头状癌,在临床上也不少见。本研究通过检测BRAF基因及TSHR蛋白在甲状腺组织中的表达差异,联合对比临床病理结果,寻找能预测PTMC局部组织侵袭性和颈部淋巴结转移潜能的指标,旨在术前全面科学评估病情,术中选择合理精准的手术方式,为患者提供个体化的诊疗支持。方法本研究选取了2015年09月01日至2016年08月31日聊城市人民医院甲状腺乳腺外科收治的162例PTMC患者的原发灶石蜡包埋标本,并统计相应病例的临床参数,包括患者的性别、年龄、病理诊断、原发灶大小、原发灶及颈部淋巴结手术方式、肿瘤直径（以0.5cm为界）、病灶个数、中央区及颈侧区淋巴结转移个数及转移率、原发灶突破腺体包膜等情况。全部病例临床参数根据AJCC/UICC2010年发布的甲状腺癌TNM分期系统重新统计,进行分期。选取同时间段手术的甲状腺良性病变和癌旁正常组织石蜡包埋标本各30例,设为对照组。1.应用荧光定量PCR技术将PTMC原发灶、良性病变组织和癌旁正常组织扩增后,检测PTMC原发灶、良性肿块及癌旁正常组织中BRAF基因的表达情况。应用免疫组织化学方法检测PTMC原发灶、良性病变及癌旁正常组织是否存在TSHR表达及其表达情况。2.将BRAF基因、TSHR蛋白在PTMC原发灶、良性病变及癌旁正常组织中的表达结果联合转移淋巴结的情况进行对比,找出其临床因素相关性。实验数据采用统计学软件SPSS 20.0进行分析,计数资料以例数表示,单因素相关分析、突变率、表达率的比较采用Kruskal-Wallis检验,中央区与BRAF基因及TSHR相关性采用趋势卡方检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。结果1.162例PTMC原发灶中BRAFV600E突变135例,突变率为83.3%。甲状腺良性病变、癌旁正常组织各30例的突变数均为0。135例BRAFV600E突变的PTMC中,伴有中央区淋巴结转移85例,转移率为63%;27例为野生型的PTMC中,伴有中央区淋巴结转移9例,转移率为33%。应用趋势χ2检验的结果显示,趋势χ2=5.704,P=0.017,说明中央淋巴结转移数目越多,突变型的比例越高,突变的概率就越大。综合PTMC组BRAF基因表达结果与各项临床参数的单因素分析,BRAFV600E突变与PTMC的原发灶大小、包膜浸润、转移淋巴结有关,与患者的年龄、性别、TNM分期、原发灶数量无关。2.PTMC组中TSHR低表达为92例,高表达为70例,甲状腺良性病变及癌旁正常组织的TSHR表达均为正常。92例TSHR低表达的PTMC中,伴有中央区淋巴结转移58例,转移率为63%;70例为高表达的PTMC中,伴有中央区淋巴结转移27例,转移率38.6%。应用趋势χ2检验的结果显示,中央淋巴结转移数目越多,低表达的比例越高,低表达的概率就越大（趋势χ2=11.036,P=0.001）。综合PTMC组TSHR表达结果与各项临床指标的单因素分析,TSHR与PTMC的原发灶大小、包膜浸润、转移淋巴结有关,与患者的年龄、性别、TNM分期、原发灶数量也同样无关。3.BRAF基因检测与TSHR的表达相关的吻合率为53.1（K=0.06,P=0.256）,两者并无相关。结论1.BRAFV600E突变是鉴别诊断甲状腺良恶性肿瘤的标志之一。BRAFV600E突变与PTMC原发灶大小、包膜浸润、淋巴结转移有关,与年龄、性别、TNM分期、原发灶数量无关,并且中央淋巴结转移数目越多,突变的概率就越大。2.TSHR蛋白在PTMC中的表达主要位于细胞膜上,可以鉴别诊断甲状腺良恶性肿瘤。TSHR的表达与PTMC原发灶大小、包膜浸润、淋巴结转移有关,与年龄、性别、TNM分期、原发灶数量无关,并且中央淋巴结转移数目越多,低分化的概率就越大,侵袭性就越强。3.BRAFV600E突变和TSHR蛋白表达无相关性（P=0.256）,但吻合系数说明两者对于PTMC的诊断意义并不类似,对于预测PTMC的侵袭性和淋巴结转移情况可以联合使用,这样对于临床的指导或许更有意义。