背景：随着溶栓、介入及冠脉搭桥等技术及药物治疗的发展，急性心肌梗死患者得到更为及时有效的救治及预后，但急性心肌梗死（Acute myocardial infarction，AMI）是发达国家最主要的致死及致残原因之一。我们的早期研究发现，在AMI发生初期自噬被激活。随着心肌缺血持续性加重，自噬流发生障碍，进一步加重急性心肌梗死后的心室重构。近年来，越来越多的研究表明，在急性心肌梗死发生过程中，自噬通过降解受损细胞器为心肌细胞提供代谢循环所需物质，从而发挥抗心肌缺血损作用。因此，自噬降解系统可能可以成为开发治疗急性心肌梗死药物的有效靶点。　　川陈皮素属于多甲氧基黄酮，广泛存在于芸香科植物的果皮中，目前主要采用植物萃取法及化学合成法进行制备。早期研究表明，川陈皮素具有抗炎症、抗氧化、抗动脉粥样硬化、抗糖尿病、抗肿瘤及肝脏保护作用。近几年人们开始关注川陈皮素在心脑血管系统中作用。动物实验表明，川陈皮素具有抗脑缺血引起的记忆衰退及抗脑缺血再灌注损伤作用，但川陈皮素是否具有抗心肌缺血损伤作用仍不清楚。　　据此，本课题通过结扎大鼠冠状动脉左前降支（Left anterior Descending，LAD）构建SD大鼠急性心肌梗死模型，体外通过氧葡萄糖剥夺（Oxygen-glucose deprivation,OGD）处理H9C2心肌细胞构建心肌缺血模型，探讨川陈皮素是否通过调控自噬流发挥抗心肌缺血损伤作用。　　第一部分 川陈皮素改善大鼠急性心肌梗死后心室重构的作用及其机制研究　　目的：在体内采用SD大鼠冠状动脉左前降支永久性结扎手术构建大鼠急性心肌梗死模型，明确川陈皮素改善大鼠急性心肌梗死后心室重构的作用及机制。　　方法：将60只SD大鼠随机分为6组：假手术组（Sham组）、模型组（AMI组）川陈皮素低剂量组（AMI+Nob-L）、川陈皮素中剂量（AMI+Nob-M）、川陈皮素高剂量组（AMI+Nob-H）及阳性药物依那普利组(AMI+Ena组)。结扎冠状动脉左前降支（LAD）建立大鼠心肌梗死模型。①术后21天后，分别采用小动物超声成像系统检测大鼠心功能；②称重计算心脏体重比，TTC染色法检测心肌梗死面积；③采用HE及Masson染色检测心肌重构程度；④采用Western blot法检测心脏梗死周边区自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达及凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3的表达。　　结果：①与Sham组相比，AMI组大鼠射血分数（EF）和短轴缩短率（FS）减小；与AMI组相比，AMI+Nob-M组、AMI+Nob-H组及Ena组大鼠EF和FS提高；②与Sham组相比，AMI组大鼠左心室/体重比值及梗死面积增大；与AMI组相比，AMI+Nob-M组、AMI+Nob-H组及AMI+Ena组大鼠左心室/体重比值及梗死面积减小；③与Sham组相比，AMI组大鼠心肌细胞排列紊乱及纤维化面积增大；与AMI组相比，AMI+Nob-M组、AMI+Nob-H组及AMI+Ena组大鼠心肌细胞排列相对整齐及纤维化面积减小；④与Sham组相比，AMI组大鼠梗死周边区LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值及p62表达均增加，自噬流障碍，凋亡蛋白Cleaved Caspase3表达增加；与AMI组相比，AMI+Nob-M组鼠梗死周边区LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值无明显差异，p62表达减少，自噬流得到改善，凋亡蛋白Cleaved Caspase3表达减少。　　小结：①急性心肌梗死21天后大鼠心肌细胞凋亡增加，梗死面积和心肌纤维化严重，心脏功能降低；给与川陈皮素及依那普利后，心肌细胞凋亡减少，梗死面积和心肌纤维化改善，心功能得到改善。②急性心肌梗死21天后，心肌细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值增加，p62发生堆积，自噬流发生障碍；给与川陈皮素后，心肌细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值无明显变化，p62堆积减少，自噬流得到改善。　　第二部分 川陈皮素对H9C2大鼠心肌细胞缺血损伤的保护作用及其机制研究　　目的：在体外采用氧葡萄糖剥夺H9C2心肌细胞构建心肌缺血模型，明确川陈皮素对H9C2大鼠心肌细胞缺血损伤的保护作用和自噬流改变情况，并探讨其可能分子机制。　　方法：实验分为3组：正常对照组（CTL组）、氧葡萄糖剥夺组（OGD组）和川陈皮素给药组（OGD+Nob组）。①采用MTT及Annexin V/PI双染色法检测细胞的死亡情况；②Western blot法检测LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、Cleaved Caspase3的表达；③m-RFP-GFP-LC3双标腺病毒转染H9C2检测自噬体和自噬溶酶体的变化；④采用自噬抑制剂CQ及3-MA进一步验证川陈皮素是否通过改善自噬流障碍保护心肌缺血损伤；⑤Lyso-Tracker Red溶酶体红色荧光探针检测溶酶体酸度。　　结果：①MTT、AnnexinⅤ/PI双染结果显示：与CTL组，OGD组心肌细胞活力降低，凋亡增加；与OGD组相比，OGD+Nob组心肌细胞活力增强，凋亡减少；②Western blot结果显示：与CTL组相比，OGD组心肌细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值及p62表达均增加，自噬流发生障碍，凋亡蛋白Cleaved Caspase3表达增加；与OGD组相比，OGD+Nob组心肌细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值无明显差异，p62表达减少，自噬流障碍得到改善，凋亡蛋白Cleaved Caspase3表达减少；③m-RFP-GFP-LC3双标腺病毒转染结果显示：与CTL组相比，OGD组心肌细胞溶酶体数量减少，自噬溶酶体数量增多，自噬流发生障碍；与OGD组相比，OGD+Nob组心肌细胞溶酶体数量增多，自噬溶酶体数量减少，自噬流障碍得到改善；④自噬抑制剂CQ及3-MA干扰结果显示：与OGD+Nob组相比，给与CQ与3-MA均能部分逆转Nob的抗心肌缺血损伤作用，且前者逆转作用较后者显著；⑤溶酶体红色荧光探针检测结果显示：与CTL组相比，OGD组心肌细胞溶酶体酸度无明显差异；与OGD组相比，OGD+Nob组心肌细胞溶酶体酸度明显增强。　　小结：①OGD处理12小时后，H9C2心肌细胞活力降低，凋亡增加，给与川陈皮素后，细胞活力增强，心肌细胞凋亡减少；②OGD处理12小时后，H9C2心肌细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值增加，p62发生堆积，自噬流发生障碍；给与川陈皮素后，心肌细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值无明显变化，p62堆积减少，自噬流得到改善。给与自噬抑制剂CQ和3-MA后，川陈皮素抗心肌缺血损伤作用被逆转；③川陈皮素通过增强溶酶体酸度改善自噬流障碍。　　全文结论：　　1.川陈皮素改善大鼠心肌梗死后的心肌缺血损伤及心室重构。　　2.川陈皮素通过增强溶酶体酸度改善缺血损伤引起的自噬流障碍。