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异育银鲫(Carassius auratus gibelio)是我国华东和华中等养殖地区主要的淡水养殖鱼类之一,鱼苗需求量大,已成为许多鱼苗繁育场的主产鱼苗。近年来,每年的五月中旬开始,异育银鲫鱼苗在培育过程中体表会出现由武汉单极虫寄生而形成众多孢囊的疾病,该病具有流行广、感染率高和造成一定的累积死亡率等的特点,培育池一旦出现该病,病鱼的销售困难以及鱼苗的大量死亡给异育银鲫鱼苗繁育场带来了巨大的经济损失。根据组织病理学的方法将患病的异育银鲫鱼苗体表孢囊内有无成熟孢子以及成熟孢子的崩溶解程度,首次将武汉单极虫病划分为发生、发展、消退和消失4个疾病时期,为明确武汉单极虫病在四个时期的疾病过程并为该疾病的防控提供相关措施和一定的科学理论依据,进行了武汉单极虫感染部位病鱼病症和孢囊形态、组织病理学、分子生物学核酸检测和药物防控试验的研究。通过肉眼观察病鱼和运用体视显微镜对异育银鲫武汉单极虫感染鱼体体表后所形成孢囊繁育过程进行了宏观上的形态学观察,发生期时,病鱼活力等无明显异常,体表刚形成的孢囊使鳞片和皮肤微微隆起,孢囊呈乳白色,表面无或有极少量的黑色素细胞分布;发展期孢囊的数量和大小开始增多增大,最大直径可达4 mm左右,其表面因黑色素细胞的增加而呈灰黑色,可见的孢囊数量也逐渐增多,最多每尾鱼苗体表感染强度高的孢囊数可达40个左右,孢囊使覆盖在其上的鳞片出现不同程度的竖立或弯曲,有时孢囊可重叠生长在表皮的某一位置,从而使鱼体变形,数量众多的孢囊也会吸取鱼体的营养,可使鱼消瘦、游动困难,严重的病鱼苗会出现畸形大量死亡现象;消退期时,病鱼体表上的孢囊开始逐渐缩小,逐渐缩小的孢囊使其上的黑色素细胞间间距也逐渐缩短,孢囊相对更黑,能进入这一时期的病鱼一般不再出现死亡现象,鱼苗活力、摄食和生长逐渐恢复;消失期时的病鱼孢囊隆起已不再明显,逐渐变得较为平坦,孢囊的缩小使黑色素细胞更加紧密,肉眼观为近乎平坦的深黑色,随着黑色素细胞逐渐减少而原孢囊部位呈淡黑色至几乎接近鱼体组织正常颜色,但肉眼还可辨认出原孢囊病灶,病鱼在此时摄食、游动、生长趋于正常。10月下旬后原孢囊部位病灶完全消失,病鱼苗处于完全康复状态。武汉单极虫病感染部位组织病理结果表明,发生期的孢囊表面无或有极少量的黑色素细胞分布,孢囊内分布着正在繁育逐渐增多的营养体,尚未出现成熟孢子;发展期的病鱼孢囊内已出现成熟孢子,孢囊逐渐增多增大,其表面黑色素细胞增加而呈灰黑色,未成熟孢子全部发育为成熟孢子时孢囊达到最大,感染强度高的病鱼出现死亡或畸形;消退期的成熟孢子通过破裂孢囊流入水体或不同步地崩溶解而减少直至全部溶解,孢囊随之逐渐缩小,使得黑色素细胞更为密集,消失期的病鱼孢囊平坦,内已无成熟孢子,只残留和逐渐减少的成熟孢子崩溶解物质,黑色素细胞逐渐减少,最后原孢囊部位被结缔组织取代。本研究不仅首次通过组织病理学的方法将武汉单极虫病疾病过程划分为发生、发展、消退及消失4个时期,而且揭示了武汉单极虫寄生部位在4个疾病时期的病理变化特点,明确了疾病消退和消失的两种方式,孢囊内成熟孢子通过破裂孢囊进入水体的方式和首次发现的孢囊内成熟孢子通过崩溶解的方式。通过运用巢式PCR分析的方法对整个疾病过程中不同时期的感染部位酸遗传物质进行了检测,结果表明,巢式第一轮和第二轮PCR在4个疾病时期都分别能扩增出1584 bp和853 bp的武汉单极虫目的条带,但在消失期的后期只有巢式第二轮PCR扩增出853 bp目的条带,说明残留的核酸物质含量逐渐减少,10月下旬后原孢囊部位巢式PCR扩增已无条带出现。在疾病的发生期发展期和消退期都能够检测到武汉单极虫的核酸遗传物质,而在进入到疾病的消失期后,随着时间的变化,核酸遗传物质逐渐减少,尤其在疾病消失期的后期孢囊内组织病理观察不到孢子残留物的情况下,通过巢式PCR分析残留的核酸物质,对进一步探究该类寄生虫是否还存在另一生活史途径有着重要意义。地克珠利(diclazuril)、环烷酸铜(copper naphthenate)和盐酸氯苯胍(hydrochloride)是具有高效性格和抗广谱性的药物在畜牧业生产中尤其是禽类养殖生产中被广泛应用,在水产养殖中主要由于鱼类粘孢子虫病的防治,目前还未见其在异育银寄武汉单极虫病上防控的相关报道。本研究通过对此三种药物的9个试验药物组对患武汉单极虫病的异育银鲫鱼苗进行了实验室防控28天的试验,结果表明,同一疾病时期,9个药物试验组的患病鱼感染部位出现的孢囊大小有所缩小现象,其表面的黑色素有较正常消退有变暗变淡的现象,患病鱼活力较照组强,8月上旬,9个药物试验组存活下来的原患病鱼体表孢囊基本消退,只残留原孢囊部位少量黑色素和病灶,而此时对照组的发病时期还正处于疾病的高峰期,至10月上旬始,9个试验药物组的患病鱼都已恢复健康,体表无孢囊痕迹存在,且与正常鱼组织无差别,而对照组患病鱼体表还残留有孢囊痕迹病灶,因此来说药物试验组与对照组相比具有一定的防控效果;地克珠利在药浴浓度为0.9 ug/ml、1.8 ug/ml和2.7 ug/ml连续用药7天后停药,至28天时该3个药物试验组患病鱼苗均存活下来,存活率高于对照组70%,说明具有较好的防控效果;按鱼苗体重拌饵连续口服7天,每天分别投喂2 ug/g地克珠利组和0.08 ug/g盐酸氯苯胍组的防控效果低于浓度为0.9 ug/ml、1.8 ug/ml和2.7 ug/ml地克珠利的药浴试验,患病鱼存活率均高于对照组的20%,有一定的防控效果;0.8 ug/ml环烷酸铜和1.2 ug/ml环烷酸铜药浴组存活率高于对照组10%,有防控效果;而4ug/g的地克珠利和0.16ug/g盐酸氯苯胍口服组存活率均分别低于对照组10%和65%,说明这2个试验药物组对武汉单极虫病无防控效果。