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甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)又叫甜菊、甜茶等，为菊科多年生草本植物，其叶子具有甜味。目前从甜叶菊中分离得到的有甜菊苷、甜菊双糖苷、杜克苷等二萜苷，还有黄酮、酚类等成分。其中的主要成分之一甜菊苷是从甜叶菊中提取的一种天然甜味剂，其甜度为蔗糖的300倍，因此被誉为“世界第三糖源”，甜菊苷目前被大量作为甜味剂应用于食品中。甜菊苷具有降血糖、降血压、抗炎、抗肿瘤、止泻、抗菌和免疫调节等多种生物活性。然而，从中分离得到的其它主要甜菊糖苷类还未被开发利用。因此，为了进一步挖掘甜叶菊的食用和药用价值，甜叶菊经去除甜菊糖苷类成分之一的甜菊苷后，分别得到了另外的两种甜菊糖苷类混合物T5、T3。 目的:针对这两种甜菊糖苷类混合物T5、T3，首先考察了他们对ConA和LPS分别诱导的脾脏T、B淋巴细胞增殖的作用。然后我们拟运用LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell来研究他们的抗炎活性，并且通过研究对NF-κB和MAPK炎症信号通路中蛋白磷酸化的影响，进一步探索他们的抗炎作用机制。 方法:H3-TdR掺入法检测T5、T3对ConA和LPS分别诱导的脾脏T、B淋巴细胞增殖的作用;Griess法检测LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中NO的表达;ELISA法检测LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的含量;RT-PCR法检测LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2、iNOS mRNA的表达;流式细胞检测LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7cell的细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot检测LPS诱导的巨噬细RAW264.7cell中p-ERK、p-p38、p-JNK和p-p65、p-IκB的表达;免疫荧光染色法检测LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中NF-κB p65的核转运。 结果:1.T5、T3在一定浓度内抑制了ConA和LPS分别诱导的脾脏T、B淋巴细胞的增殖;2.T5、T3在一定浓度内抑制了LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中NO、PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的表达;3.T5、T3在一定浓度内抑制了LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2、iNOS mRNA的表达;4.T5、T3在一定浓度内促进了LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell的细胞凋亡和阻滞了G2/M细胞周期;5.T5、T3在一定浓度内抑制了LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 cell中MAPK和NF-κB信号通路中的p-ERK、p-p38、p-JNK和p-p65、p-IκB的表达;6.T5、T3在一定浓度内抑制了LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7cell中的NF-κB p65向细胞内的核转运。 结论:本文的研究证明了:T5、T3能在一定浓度范围内抑制ConA和LPS分别诱导的小鼠原代脾脏T、B淋巴细胞的增殖。本文的研究结果进一步显示:T5、T3（100、200、400μg/ml）能有效的抑制NO、PGE2、 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10等炎症因子的表达，其作用机制主要是通过抑制MAPK和NF-κB炎症信号通路中的p-ERK、p-p38、p-JNK和p-p65、p-IκB的表达来实现的。