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目的:1.建立并评价维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B9、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E血浓度电化学测定方法;2.常规采集、测定2013年3月至2014年11月某三甲医院新生儿和婴幼儿、孕妇、老年患者,以及术后、创伤等消耗性疾病及不能进食的重症疾病患者的上述9种维生素血清浓度;3.统计分析九种维生素检测数据,确定不同疾病患者九种维生素浓度测定值与正常浓度范围之间的差异,为维生素相关性(维生素缺乏症或过多症)疾病的诊断和治疗提供实验依据,进一步促进维生素的临床合理应用。方法:1.采集新生儿和婴幼儿、孕妇、老年患者,以及术后、创伤等消耗性疾病及不能进食的重症疾病患者肘静脉血3 mL,置不含添加剂的普通血清真空采血管(红帽)中,4000 rpm离心4 min,取血清当日测定。2.采用LK3000V维生素检测仪测定血清中维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B9、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E九种维生素的浓度。取患者待测血清(其中维生素A、维生素D、维生素E取血清80μL;维生素B9、维生素B12和维生素B6中分别取血清40 μL,维生素B2取血清20 gL;维生素B1取血清10μL),加入到样本处理液中,对电极进行处理后进行测定。3.统计分析不同患者人群九种维生素检测数据,绘制各维生素检测数据散点图,确定不同疾病患者九种维生素测定值与正常范围的差异,分析导致不同患者人群维生素过多或缺乏的原因。4.统计分析672例新生儿和婴幼儿患者九种维生素血浓度数据,绘制各维生素检测数据散点图,确定不同患者人群九种维生素测定值与正常范围的差异,分析引起此差异(维生素浓度过高或偏低)的原因,以诊断新生儿和婴幼儿体内各维生素缺乏或过多症。结果:1.不同维生素,摄入量不同,维持机体正常功能的量不同,从而具有不同线性范围,其测定也需建立不同标准曲线。维生素A线性范围为0.67-3.38 μmol/L,标准曲线为y=6.56131 x+0.57857(r=0.9999);维生素B1线性范围为33-265 nmol/L,标准曲线为y=48.8445 x+25.6258(r=0.9999);维生素B2线性范围为194-968μg/L,标准曲线为y=473.184 x+178.182(r=0.9999);维生素B6线性范围为14.6.146 μmol/L,标准曲线为v=361.344 x-14.3965(r=0.9985);维生素B9线性范围为11.8.118 nmol/L,标准曲线为y=237.524 x-3.12678(r=0.9999);维生素B12线性范围为203-1015 pg/mL,标准曲线为y=3575.17 x-52.1452(r=0.9998);维生素C线性范围为34-138 μmol/L,标准曲线为y=441.621 x+15.8955(r=0.9999);维生素D线性范围为20.200 nmol/L,标准曲线为y=530.894 x-4.29012(r=0.9999);维生素E线性范围为10.30 μg/mL,标准曲线为y=27.5103 x+9.45439(r=0.9999)。九种维生素线性范围内线性关系良好,其线性范围覆盖临床上的维生素的标准值范围,可用于临床患者血清维生素浓度测定。2.自2013年3月至2014年11月,山东大学齐鲁医院药物监测中心接收的临床常规送检样本,维生素A、D、E 2050例,维生素B1和维生素C 1894例,维生素B2和维生素B61857例,维生素B9、B122028例;患者人群包括新生儿和婴幼儿、孕妇、老年患者,以及术后、创伤等消耗性疾病及不能进食的重症疾病患者,年龄最小者出生3分钟的新生儿,最大者99岁。3.患者维生素A浓度测定值均值与标准差为0.63±0.30μmol/L(n=2050),最小值为0.30μmol/L,最大值为9 μmol/L,最大值为最小值的30倍。维生素B1浓度测定值均值与标准差为125.72±60.67nmol/L(n=1894),最小值为11.01 nmol/L,最大值为640.42 nmol/L,最大值为最小值的58.17倍。维生素B2浓度测定值均值与标准差为227.58±73.39μg/L(n=1857),最小值为8.01μg/L,最大值为1348.84μg/L,最大值为最小值的168.39倍。维生素B6浓度测定值均值与标准差为36.18±23.43μmol/L(n=1857),最小值为4.26μmol/L,最大值为204.67μmol/L,最大值为最小值的48.04倍。维生素B9浓度测定值均值与标准差为9.43±6.58nmol/L(n=2028),最小值为0.03 nmol/L,最大值为160.51nmol/L,最大值为最小值的5350.33倍。维生素B12浓度测定值均值与标准差为279.65±142.44 pg/mL(n=2028),最小值为3.63 pg/mL,最大值为1014.7 pg/mL,最大值为最小值的279.53倍。维生素C浓度测定值均值与标准差为40.48±12.66μmol/L(n=1894),最小值为0.39μmol/L,最大值为209.46μmol/L,最大值为最小值的537.08倍。维生素D浓度测定值均值与标准差为38.71±26.56μmol/L(n=2050),最小值为0.36 nmol/L,最大值为485.65 nmol/L,最大值为最小值的1349.03倍。维生素E浓度测定值均值与标准差为12.58士7.90μg/mL(n=2050),最小值为0.63μg/mL,最大值为300.18μg/mL,最大值为最小值的476.48倍。4.672例新生儿和婴幼儿患者维生素检测结果显示,维生素A缺乏患者占维生素A总测定人数的36%,维生素A过量患者占0.3%。维生素B1缺乏者占维生素B1总测定人数的7%,维生素B1过量者占28.1%。维生素B2缺乏者占维生素B2总测定人数的20.5%。维生素B6缺乏者占维生素B6总测定人数的7.2%,维生素B6过量者占8.1%。维生素B9缺乏者占维生素B9总测定人数的49.8%,维生素B9过量者占0.6%。维生素B12缺乏者占维生素B12总测定人数的52.1%。维生素C缺乏者占维生素C总测定人数的42.5%,维生素C过量者占0.9%。维生素D缺乏者占维生素D总测定人数的28.4%,维生素D过量者占0.3%。维生素E缺乏者占维生素E总测定人数的21.8%,维生素E过量者占8.8%。结论:本文对电化学方法同时测定血清中维生素A,维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B9、维生素B12、维生素C,维生素D和维生素E浓度的方法进行了考察评价,方法灵敏、准确、快速、重复性好。所建立的九种维生素浓度测定的标准曲线范围覆盖维生素临床范围,可用于九种维生素临床相关性(维生素缺乏症或过多症)疾病的血浓度的常规监测。检测数据有助于某些维生素相关性疾病的诊断和个体化治疗。九种维生素测量值最大值与最小值相差较大,其中相差最多的为维生素B6,最大值为最小值的5350.33倍,各人群维生素测量值相差较大,临床正常参考值并不能完全适用于所有人群,有必要建立各分类人群各自的维生素正常值范围。新生儿与婴幼儿人群中维生素A,维生素B2,维生素B9,维生素B12,维生素C,维生素D和维生素E缺乏者占大多数,而维生素B1过量者占的比例较大。因此新生儿和婴幼儿在生长发育过程中应注意补充维生素A,维生素B2,维生素B9,维生素B12,维生素C,维生素D和维生素E,并应防止维生素B1的过量。电化学方法同时测定血清中九种维生素血清浓度,可在一定条件下用于维生素相关性疾病的诊断,但也有一定局限性,如方法本身与公认方法,如LC-MS法的相关性;某些异常值与维生素相关性疾病临床诊断的相关性信息尚不明确,尚需大样本临床患者数据进行相关性分析。