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因任何形式的基因突变均在蛋白水平发挥其功能,因此蛋白翻译起始因子(EIF)和肿瘤的关系日益受到重视,尤其是eIF-1,但因其全长基因序列未被克隆,使对eIF-1的功能研究受到很大的限制。Liu等通过应用抑制差减杂交及5’、3’全长CDNA扩增技术(RACE PCR)从人肝癌细胞株(HepC2)中克隆出的一新基因,命名为C2,并制备了抗体。C2全长为1.3kB,阅读框架编码113个氨基酸,体外蛋白翻译显示Mr13000,经基因库比较,目前仅知的蛋白翻译起始因子eIF-1的两端的部分氨基酸序列和C2完全同源,并且和与人类同源的酵母菌的蛋白翻译起始因子Suil高度同源,故C2被认为是人的蛋白翻译起始因子eIF-1的全长基因序列。因人的eIF-1的全长基因序列被克隆,使对其进一步功能研究成为可能。继而做初步功能研究,发现C2基因可抑制细胞生长,其表达可被HBXAg所抑制。HBXAg与肝细胞肝癌(HCC)发病密切相关。提示C2基因可能与HCC的发生有关。 目的和方法:为进一步分析C2可能的意义及功能,本研究利用免疫组织化 第川羊医人学何卜卜学位论义 一 学、mRNA分子原位杂交、Western blot技术,对 CZ蛋白及其 mRNA在组织中的 分布进行了检测,以探索其在消化道肿瘤中的表达倩况和意义。 结果:l.CZnRNA及其蛋白在HCC中的表达26例HCC及其癌旁组织中, CZmRNA阳性率分别占 23.l%(6/26 ) 和 76.9%(20/26)。60例*C及 42例癌 旁组织中,CZ蛋白阳性率分别占 27.3%(17/60)和 83.3%(35/42)。27例肝硬 化中,CZ蛋白阳性率为 77.8%(ZI/27)。X‘检验:CZmRNA及其蛋白在 HCC癌旁 组织中表达明显高于癌组织(尸价.00):CZ蛋白在肝硬化中的表达明显高于 HCC癌组织(尸(0.of);CZ 的表达与病人年龄、HBSAg及 AFP有明显关系(尸 (0.05):而与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无关;Western blot 与免疫组化结果一致。 2.在HBXAg表达阳性的49例HCC中,10例CZ蛋白阳性,阳性率为20.4%, 在 HBXAg阴性的 11例 HCC中,7例 CZ蛋白阳性,阳性率为 63.6%。X’检验: CZ在 HBXAg阳性的*C中的表达明显低于 HBXAg阴性的*C(P(0.05)。 3.在 58例原发性胃癌中,CZ蛋白阳性率为 41.4%(24/58),44例其癌旁 组织中,CZ蛋白阳性率为 77.3%(34/44)。X’检验:CZ蛋白在胃癌组织中表 达明显低于其癌旁组织(尸(0.05),且与胃癌组织的分化程度、浆膜浸润、肿 瘤大小有明显的相关性(尸(0.05)。 4.在31例结肠癌中,CZ蛋白阳性率为41.9%(1y用):23例其癌旁组织 中,CZ蛋白阳性率为82.6%(19/23)。X’检验:CZ蛋白在结肠癌组织中的表 达明显低于其癌旁组织(RO.05),且与淋巴结转移、浆膜浸润明显相关 (HO.05) 5.CZ蛋白在其它肿瘤组织中的分布 直肠癌23例,CZ蛋白阳性率为 斗 第凹军医人学颀卜学位论文 一 43.5%(10/23),15例服旁测中,CZ蛋白阳脾为73.3%(11/15)。X‘怫: CZ蛋白在直肠癌组织及其癌旁组织中的表达无明显差异(P>0.05)。肺癌 门 例,CZ 蛋白阳性率为 54.5%(6/l),5例其癌旁组织中,CZ 蛋白阳性率为 60.0%(3/5)。 结论CZ基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断有关。HBXAg 对CZ的抑制作用可能与HCC的发生,发展有关。CZ蛋白的表达水平随着胃癌 恶性程度的增加而降低,其表达下调可能与胃癌的发生,发展有关。CZ蛋白 表达下调可能与结肠癌的发生,发展有关。本研究提出HBV的DNA病毒对宿主 细胞蛋白翻译水平的调节可能为HCC发生的分子机制之一。CZ可能是一潜在 的抑癌基因。关于CZ基因更详细的功能有待进一步研究c