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目的:1.分析低分化胃癌细胞株BGC-823、中等分化胃癌细胞株SGC-7901和正常胃黏膜上皮细胞GES-1中PI3K、m TOR、PTEN等关键蛋白表达的差异,检测PI3K/Akt/m TOR信号通路在胃癌中的激活情况。2.分析胃癌病人与健康人群中PI3K/Akt/m TOR信号通路中PI3K、PTEN、m TOR等关键蛋白表达的差异,结合PI3K/Akt/m TOR信号通路在人群外周血单个核细胞中的激活情况,探索PI3K、PTEN、m TOR及其磷酸化形式p-PI3K、p-m TOR、p-PTEN与胃癌发生的相关性。3.筛选胃癌发生的环境危险因素,并分析相关关键蛋白与环境危险因素在胃癌发生中的交互作用。方法:1.体外培养人低分化胃癌细胞株SGC-7901、中等分化胃癌细胞株BGC-823和正常胃粘膜上皮细胞GES-1,应用Western Blot法检测总蛋白PI3K、m TOR、PTEN和磷酸化蛋白p-PI3K、p-m TOR、p-PTEN的定量表达。2.随机选择74例新发胃癌患者和70例健康人群,提取两组人群外周血单个核细胞,Western Blot法检测外周血单个核细胞中总蛋白PI3K、m TOR、PTEN和磷酸化蛋白p-PI3K、p-m TOR、p-PTEN的定量表达。3.胃癌患者和健康人群采用统一调查问卷进行调查。包括年龄、性别等一般情况,疾病和肿瘤家族史,饮食情况、吸烟饮酒等生活习惯。Western Blot法检测两组人群PI3K/Akt/m TOR信号通路关键蛋白的表达,筛选胃癌环境危险因素并利用Logistic回归分析法,分析其与蛋白表达在胃癌发生中的交互作用。结果:1.PI3K/Akt/m TOR信号通路关键信号分子在SGC-7901、BGC-823和GES-1细胞中的表达Western Blot结果表明PI3K、p-PI3K、m TOR、p-m TOR在胃癌细胞SGC-7901和BGC-823中的蛋白表达明显高于正常胃黏膜上皮细胞GES-1(P<0.05)。PTEN、p-PTEN蛋白在正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达显著高于普通胃癌细胞SGC-7901和BGC-823(P<0.05)。2.PI3K/Akt/m TOR信号通路关键信号分子在胃癌人群和健康人群外周血单个核细胞中的表达病例组中PI3K、p-PI3K、p-m TOR的蛋白表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组之间总蛋白m TOR表达无明显差异(P>0.05)。病例组中PTEN的蛋白表达量明显低于对照组,两组之间PTEN表达差异具有统计学意义(P<0.01)。病例组中p-PTEN的表达量与对照组无显著差异(P>0.05)。基于单因素分析结果对PI3K、p-PI3K、p-m TOR、PTEN等关键蛋白进行多因素logistic回归分析,经过性别年龄等因素矫正后,p-PI3K的表达与胃癌的发生显著相关(OR=1.501;95%CI=1.085-2.074;P<0.05)。p-m TOR的表达与胃癌的发生显著相关,p-m TOR的高表达可能会提高胃癌的患病风险(OR=1.462;95%CI=1.055-2.027;P<0.05)。而PI3K的表达与胃癌的发生无明显关联(OR=1.095;95%CI=0.768-1.562;P>0.05),PTEN的表达与胃癌发生无显著相关性(OR=0.730;95%CI=0.527-1.012;P>0.05)。3.PI3K/Akt/m TOR信号通路关键蛋白表达与环境危险因素在胃癌中的交互作用3.1胃癌发生的环境危险因素筛查卡方检验得出年龄、性别、饮酒、饮茶、喜食辛辣食品在病例组与对照组间的分布无显著差异(P>0.05)。病例组中学历高者明显低于对照组(P<0.05)。病例组中具有消化系统疾病家族史者较对照组多(P<0.05)。病例组中具有肿瘤家族史者显著高于对照组(P<0.05)。吸烟者在病例组与对照组分布具有显著差异,病例组中吸烟者多于对照组(P<0.05)。病例组中常吃新鲜蔬菜者明显少于对照组(P<0.05)。病例组中喜食腌制食品者明显高于对照组(P<0.05)。病例组中喜食油炸食品者显著多于对照组(P<0.01)。logistic回归结果显示,具有消化系统疾病家族史者患胃癌的风险为不具有消化系统疾病家族史者患胃癌风险的2.516倍(95%CI=1.139-5.558;P<0.05)。肿瘤家族史者相较于非肿瘤家族史者罹患胃癌的风险显著增加(OR=3.449;95%CI=1.220-9.699;P<0.05)。吸烟者罹患胃癌的风险是非吸烟者的2.815倍(95%CI=1.287-6.155;P<0.05),少吃新鲜蔬菜者罹患胃癌的风险是多吃新鲜蔬菜者的2.510倍(95%CI=1.077-5.847;P<0.05),喜食新鲜蔬菜是胃癌的保护因素。喜食油炸食品会显著增加胃癌发生的风险(OR=2.858;95%CI=1.155-7.068;P<0.05)。而喜食腌制食品与胃癌发病无显著性关联(OR=1.793;95%CI=0.597-5.387;P>0.05)。3.2相关关键蛋白表达与环境危险因素在胃癌中发生的交互作用分析Logistic回归分析表明,p-PI3K蛋白表达与消化系统疾病家族史具有交互作用(OR=1.710;95%CI=1.179-2.480;P<0.05)。具有消化系统疾病家族史者随着p-PI3K表达每增加一个梯度,胃癌的患病风险会增加211.6%(OReg=eβe+βg=3.116)。p-PI3K蛋白表达与喜食油炸食品者具有交互作用(OR=0.459;95%CI=0.237-0.891;P<0.05)。喜食油炸食品者随着p-PI3K表达每增加一个梯度,患有胃癌的风险会下降16.4%(OReg=eβe+βg=0.836)。PTEN与喜食油炸食品者具有交互作用(OR=3.153;95%CI=1.603-6.204;P<0.01),喜食油炸食品者PTEN蛋白表达每增加一个梯度,罹患胃癌的风险降低11.4%(OReg=eβe+βg=0.886)。PTEN表达与饮茶具有交互作用(OR=2.367;95%CI=1.023-5.474;P<0.05),不饮茶者随着PTEN蛋白表达量每增加一个梯度,胃癌的患病风险降低33.5%(OReg=eβe+βg=0.665)。PTEN高表达者中饮茶者较不饮茶者罹患胃癌的风险降低88.4%(OReg=eβe+βg=0.116)。PTEN表达与肿瘤家族史之间具有交互作用(OR=1.914;95%CI=1.253-2.924;P<0.01),肿瘤家族史者随着PTEN表达每增加一个梯度,胃癌的发病风险降低46.2%(OReg=eβe+βg=0.538)。同时结果显示m TOR表达和吸烟具有交互作用(OR=1.919;95%CI=1.292-2.852;P<0.01)。结论:1.PI3K/Akt/m TOR信号通路在胃癌细胞中处于激活状态,该信号通路的异常激活与肿瘤的发生、发展可能存在相关性。2.PI3K/Akt/m TOR信号通路在胃癌人群外周血单个核细胞中处于激活状态,部分癌基因激活,抑癌基因失活,增加胃癌的发生风险,导致胃癌的不良进展。3.吸烟、不良饮食习惯、肿瘤家族史是胃癌发生的危险因素,而喜食新鲜蔬菜等是胃癌发生的保护因素。部分环境因素与PI3K/Akt/m TOR信号通路中关键蛋白表达的交互作用在胃癌的发生过程中尤为重要,提示人们从基因、环境两方面探讨胃癌的发展以及寻求胃癌的预防和治疗方法。