棉铃虫是我国重要的农业害虫之一，常常造成巨大的经济损失。而化学农药长期大量的使用，不仅使得棉铃虫的抗药性剧增，且污染环境。棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(HaSNPV)是棉铃虫专一性病原微生物，具有寄主范围特异、对靶标高毒力、无药害、使用安全、害虫不产生抗药性等优点，是理想的害虫控制因子。但传统病毒杀虫剂杀虫作用缓慢、范围窄等限制了它的使用。在HaSNPV基因组中发现的18家族几丁质酶基因是一个晚期非必需基因，与受染虫体液化和病毒侵染机制密切相关，因而对该基因进行深入研究，将对病毒杀虫剂的遗传改良和新的表达系统的建立有着重要的意义。在研究中，将HaSNPV几丁质酶基因构建到具有高效分泌，且易于外源蛋白正确折叠的原核表达载体pMAL-p2X中，以期得到可溶性目的蛋白。本实验采用常规的分子生物学方法构建重组体，DNA测序鉴定正确后，转化表达宿主菌TB1，以IPTG为诱导剂，采用26℃低温下，诱导表达4小时，得到了融合蛋白，其量约占总蛋白的14.7％，上清中分泌的可溶目的蛋白含量约占总目的蛋白的20％以上。此研究为下一步的纯化、制备特异性抗体、蛋白的复性和生物学功能研究奠定了基础。为了克服HaSNPV几丁质酶基因在原核表达系统中存在的不易分离纯化、蛋白无活性等问题，本研究改用真核表达系统。实验中，首先将目的基因克隆构建到过渡载体pMD18-T-Vecter中，经转化、酶切和鉴定，再将目的基因克隆到真核表达质粒pPIC9K中，测序鉴定重组子正确后，电转化毕赤酵母GS115感受态细胞，以甲醇为诱导剂，30℃下初步预表达。经96小时诱导后，其表达效果较好，目的蛋白约占总分泌蛋白的50％。结果证明，HaSNPV几丁质酶基因已在毕赤酵母GS115中表达，得到了可溶性的蛋白。这为下一步筛选高表达菌株、发酵条件的优化、几丁质酶的结构与功能研究，乃至放大生产奠定了一个良好的基础。