两种压电陶瓷对人牙龈成纤维细胞增殖影响的实验研究

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目的:电刺激成骨已是大家公认的事实,临床上应用的电刺激形式多种多样,如何将这种电刺激效应应用于口腔领域,从而阻止剩余牙槽骨的吸收,是目前口腔学者比较关心的话题。压电陶瓷是一种新型的陶瓷材料,它可以将电能和机械能互相转换,即我们可以利用病人的咀嚼运动,使其对牙槽骨产生微电流刺激,减少骨吸收。但是,任何应用于口腔修复领域的材料,首先要直接接触的就是牙龈组织,在其发挥作用的同时,是否会对牙龈组织造成不良影响,是每种材料临床应用前必须解决的问题。本实验选取两种典型的压电陶瓷作为研究对象,即钛酸盐系的钛酸铋钠(BNT)和铌酸盐系的铌酸锂钠钾(NKN),将他们与体外培养的人牙龈成纤维细胞(HGF)共同培养,通过形态学观察、生长功能的检测、扫描电镜的观察等,评价两种压电陶瓷对HGF增殖的影响,并同传统的修复材料聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)进行比较,为其将来的临床应用提供生物学依据。方法:本实验分为三个部分。1、将组织块法和酶消化法结合培养原代人牙龈成纤维细胞,倒置相差显微镜下观察原代细胞的形态特征,进行鉴定并传代备用。利用血球计数板计数的方法绘制出细胞生长曲线。2、对压电陶瓷进行极化处理后,消毒备用。将生长良好的HGF接种于BNT和NKN压电陶瓷和PMMA表面,共同培养,在接种的1、3、5、7、9天做MTT检测,了解各组细胞的增殖情况:在接种的1、3、5、7天检测HGF碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的活性,比较各组间有无差异。3、将牙龈成纤维细胞接种在两种压电陶瓷和PMMA材料表面,并在接种6h、24h和96h后对其进行扫描电镜观察,了解细胞在材料表面的粘附情况及形态变化。结果:两种压电陶瓷表面的牙龈成纤维细胞生长情况良好,与PMMA和空白对照组相比,形态无变化,都呈贴壁生长。MTT检测显示各组细胞的增殖情况没有显著性差异(P>0.05),接种2天后细胞开始呈显著性增长,第7天达到最高峰,此后细胞数开始逐渐下降。实验组和对照组的细胞ALP活性也无显著性差异(P>0.05),并且都随时间的增加而增加。牙龈成纤维细胞在两种压电陶瓷和PMMA表面的粘附情况基本相同,6h时已在材料表面开始贴壁生长,三天时细胞已长满材料表面,细胞有沿材料表面沟纹生长的趋势。结论:将人牙龈成纤维细胞接种到压电陶瓷片表面培养,细胞的形态、增殖能力、ALP活性及贴壁能力无变化。即在我们应用其压电效应促进骨生长的同时,材料不会对其直接接触的牙龈组织造成不良影响,生物相容性较好,是一种性能优良的新型修复材料,具有临床应用的潜力。
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