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近年来，随着动物源性生物制品的逐渐增多，动物源性病毒感染人类的风险性在逐步增高，潜在的医源性感染问题也变得日益突出，但是对动物源性生物制品原材料的质量控制尚未引起相关部门的足够重视，对动物源性生物制品病毒清除/灭活工艺的验证是保证制品安全性的一个重要措施，而选择合适的指示病毒、建立稳定的病毒感染滴度测定方法及获得高滴度的指示病毒是评价该工艺有效性的先决条件。本研究旨在建立水疱性口炎病毒(VSV)感染滴度的测定方法，并制备高滴度的VSV，为其在生物制品病毒清除/灭活工艺的验证提供实验依据。本研究基于非洲绿猿猴肾细胞Vero对VSV的敏感性，通过优化Vero细胞的接种密度、VSV的接毒量、病毒的吸附时间以及细胞的感染时间等条件，建立稳定的VSV病毒滴度测定的半数细胞感染剂量法，并对已建立的方法进行重复性分析。通过筛选感染复数(MOI)、收获时间及收获样本对病毒滴度的影响等条件，制备高滴度VSV病毒，并对其进行稳定性检测。最后用已建立的VSV感染滴度的测定方法和制备出的高滴度的VSV用于生物制品病毒清除/灭活工艺验证试验中以检验其灭活工艺的有效性及安全性。研究结果表明，Vero细胞最佳接种密度为5×103个/孔、培养时间为48h及病毒吸附时间为2h，所建立的检测方法重复性较好； Vero细胞制备VSV病毒，细胞沉淀中的VSV病毒滴度高于上清，在MOI为10时，感染48h后收获，病毒滴度最高，制备的病毒液的平均滴度为10-6.88／0.1ml，4℃和25℃保存7d及反复冻融3次，稳定性良好。此外，在生物制品病毒清除/灭活工艺验证试验中，空白对照组的细胞生长正常；VSV病毒未灭活组出现明显的细胞病变；VSV病毒灭活组在注射液及原液中均丧失感染细胞毒性，VSV降低的滴度均高于4Log，灭活验证试验有效。本研究以VSV为指示病毒，成功建立VSV感染滴度测定方法，制备了高滴度且稳定的VSV病毒，并在生物制品病毒清除/灭活工艺试验中得到有效的验证，为其在生物制品病毒清除/灭活工艺的验证提供了实验依据。