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第一部分 组织因子(TF)在喉癌侵袭转移中的相关性研究目的为了探求组织因子TF和喉癌之间的关系,我们对喉癌病人的癌组织(carcinomatous tissues, CT)和癌旁组织(pericarcinomatous tissues, PT) TF的表达差异进行了分析研究,并探讨了其临床的潜在意义。方法利用GEO数据分析、免疫组化、Western-Blot和real-time RT-PCR共同分析和检测,TF蛋白在喉癌病人(n=20)的癌旁组织及癌组织中的表达情况。结果TF蛋白在喉癌病人(n=20)的癌旁组织中高表达,癌组织中低表达或不表达,两者存在极其显著的统计学差异(P<0.01)。同时,TF的mRNA在癌旁组织中表达量也显著高于癌组织(P<0.01)。GEO数据分析TF在肿瘤组织中的表达与远处正常组织表达水平无差异(P>0.05),却显著低于肿瘤切缘组织中的表达水平(P<0.01)。另外,TF表达水平低的头颈部鳞癌患者术后的无病生存时间显著长于TF表达水平高的患者。结论TF可能有助于喉癌的癌变,也可以作为判定喉癌恶性程度和进一步发展的标志物,为人类治疗和认知喉癌提供了一条新的思路。第二部分喉癌细胞胞外体诱导血管内皮细胞表达TF的机制研究目的:探讨喉癌细胞胞外体在喉癌转移侵袭中的作用,并进一步阐述胞外体诱导TF表达促进喉癌转移的分子机制。方法:培养人喉癌细胞Hep-2和人血管内皮细胞HUVEC,在HUVEC细胞中加入Hep-2细胞胞外体培养,检测TF蛋白及mRNA的改变,同时利用CCK-8增殖实验、划痕实验和transwell迁移实验检测胞外体对血管内皮细胞增殖和迁移的改变。结果:HUVEC细胞加入肿瘤胞外体后,TF蛋白及RNA表达水平明显增高(P<0.01),同时HUVEC细胞增殖明显增强(P<0.05),迁移能力亦明显增加。结论:喉癌细胞分泌的胞外体可以在体外显著刺激HUVEC细胞高表达TF,并显著增强HUVEC细胞的增殖和迁移能力。