【摘 要】
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锌指蛋白结构域是蛋白质与DNA结合模体(motif)中非常重要的一种,在许多转录因子中含有锌指DNA结合结构域.人红白血病(Humanerythroleukemiacellline,HEL)细胞系在不同的诱导
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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锌指蛋白结构域是蛋白质与DNA结合模体(motif)中非常重要的一种,在许多转录因子中含有锌指DNA结合结构域.人红白血病(Humanerythroleukemiacellline,HEL)细胞系在不同的诱导剂(Hemin与PMA)的作用下可以分别向红系和巨噬细胞两个方向分化,这种分化本质上是依靠基因的特定表达实现的,其中就有锌指结构的转录调节蛋白可能在发挥重要作用.为研究造血细胞分化,特别是红系分化过程可能涉及的新基因,该文先分别用Hemin和PMA诱导HEL细胞分化,提取RNA,反转录成cDNA,再根据锌指结构域部分氨基酸的保守序列,设计出简并PCR扩增引物,对其cDNA进行扩增,获得22个编码锌指细胞的EST.经GenBank数据库中比较后,确定其中5个为已知蛋白编码基因EST的序列,17个为新的锌指蛋白编码基因EST,在GenBank注册(登录号为:BE240813~BE240828).选择两个新EST筛选人骨髓细胞cDNA文库,获得两个新的锌指蛋白编码基因的全长cDNA,分别命名为HZF1(其EST来源于被hemin诱导的HEL细胞)和HZF2(其EST来源于被PMA诱导的HEL细胞).在此基础上进行基因结构及编码蛋白序列分析、基因表达谱分析和初步的功能研究.
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