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为防制毛皮兽(貂、狐和貉)感染阿留申病毒,本研究以阿留申病毒属内病毒序列为参考设计引物,建立了可定量检测和分型病毒的毛皮兽阿留申病毒SYBR Green I荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)和适宜现场应用的毛皮兽阿留申病毒可视化交叉引物等温检测方法(cross-priming isothermal amplification,CPA)。结果显示,qPCR和CPA可视化检测都具有较好的敏感性和特异性,检测AMDV和RFAV最低浓度分别为5.38×10~2 copies/μL和5.93×10~2 copies/μL。qPCR是一种高敏感性、特异性检测毛皮兽阿留申病毒的检测方法,并可通过实测Tm值区分阿留申病毒;CPA是一种高敏感性、特异性检测毛皮兽阿留申病毒,通过添加荧光染料实现可视化检测,可提供一种更加适合基层兽医站、养殖场的快速核酸检测方法。为调查我国辽宁和吉林省水貂、乌苏里貉和蓝狐阿留申病毒感染情况。本研究运用碘凝集(Iodine agglutination test,IAT)、对流免疫电泳(Counter immuno-electrophoresis,CIEP)和聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法或技术对辽宁和吉林省的8个养殖场共5135样品进行检测。结果表明,8个养殖场,水貂和乌苏里貉感染阿留申病毒较为严重。在对辽宁省某2个养殖场全检发现,不同感染率貂场水貂感染AMDV后疾病进程不同。进一步分析表明,低感染率貂场中IAT-CIEP-貂群比例最高,但貂群中存在感染早期貂,qPCR结果显示,连续检疫淘汰的AMDV低感染率貂场水貂相比较高感染率貂场更为敏感,AMDV在水貂体内拷贝数比高感染率貂场高2个数量级(100倍);相比之下,高感染率貂场中CIEP+水貂虽高达98%,但IAT-CIEP+貂群占41%,表明貂群中存在AMDV耐受貂和抗性貂。PCR检测进一步证明,貂群中具有其它潜在发展为耐受貂和抗性貂群体。建议通过IAT、CIEP和PCR联合检疫逐年筛选AMDV抗性貂和耐受貂。对8个养殖场部分PCR阳性样品VP2高变区测序进行系统发育学分析。进化树显示,AMDV可大致分为5组(I-V),RFAV自成1组(VI)。辽宁、吉林2省貂场主要集中在I组,同组参考序列为AMDV-Harbin和AMDV-Beijing,而JZ-SD-32和LZ-ZCSD1-B分别属于II组和V组。并且AMDV与RFAV在自然感染状态下,未发现交叉感染。总之,本研究对2省8个养殖场进行流行病学调查,并通过联合检疫调查不同感染率貂场AMDV感染状态特征,为我国AMDV和RFAV的流行特征以及养殖场引种、检疫、淘汰提供理论依据。