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目的：建立大鼠肝脏热缺血再灌注损伤模型,应用HO-1的特异性诱导剂钴原卟啉和抑制剂锌原卟啉对实验动物进行预处理,同时对TLR2介导的MyD88信号通路中相关蛋白分子、肝组织炎性因子及肝组织病理学变化进行分析,探讨HO-1在大鼠肝脏缺血再灌注损伤过程中TLR2介导的MyD88信号通路的保护作用机制,通过诱导或抑制其表达来减轻肝脏缺血再灌注损伤,为临床减轻肝脏缺血再灌注损伤提供新的思路和治疗方向。方法：1.采用Nauta RJ介绍的方法操作,建立70%肝脏缺血再灌注损伤模型。2.SPF级健康成年雄性SD大鼠,体重220-250g,被随机分为四组：(1)S组为假手术组(n=9)：术前不给于注射试剂,仅行开腹及解剖肝门手术。(2)I组为缺血再灌注组(n=9)：术前不给于注射试剂,行肝脏缺血再灌注。(3)C组为钴原卟啉(CoPP)组(n=9)：行肝脏缺血再灌注术前24小时腹腔注射HO-1诱导剂CoPP。(4)Z组为锌原卟啉(ZnPP)组(n=9)：行肝脏缺血再灌注术前24小时腹腔注射HO-1抑制剂ZnPP。于肝脏缺血再灌注、门静脉复流后24h将大鼠处死,抽取下腔静脉血5ml及获取新鲜肝脏组织,检测血清ALT和AST评价肝功能,ELISA法检测血清HMGB1含量。RT-PCR检测肝脏组织中IL-1β、IFN-γ、 HO-1、CXCL-1及CXCL-2的含量,Western blot检测肝脏组织蛋白TLR2、MyD88、Caspase-3、p/t-p38、p/t-ERK及p/t-JNK和肝脏核蛋白p-c-Jun及NF-κB的表达水平。并进一步检测TLR2信号途径相关分子在肝脏缺血再灌注肝叶中的表达变化,以探索TLR2及其介导的信号通路与HO-1保护肝脏缺血再灌注损伤的关系。组织病理主要是观察肝细胞坏死程度,免疫组化观察CD3+T淋巴细胞对肝脏汇管区浸润程度。结果：1.共成功制作大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型36例,肝脏部分缺血时间为60min。2.血清ALT和AST水平：I组、C组和Z组血清ALT和AST高于S组(p<0.05)；C组血清ALT和AST低于I组和Z组(p<0.05)；Z组血清ALT和AST高于I组(p<0.05),其差异有统计学意义。3.血清HMGB1含量：I组、C组和Z组血清HMGB1高于S组(p<0.05)；C组HMGB1(?)低于I组和Z组(p<0.05)；Z组血清HMGB1高于I组(p<0.05),其差异有统计学意义。4. RT-PCR结果：(1)I组、C组和Z组IL-1β、IFN-γ、CXCL-1及CXCL-2mRNA高于S组(p<0.05)；C组IL-1β、IFN-γ、CXCL-1及CXCL-2mRNA低与I组和Z组(p<0.05)；Z组IL-1β、IFN-γ、CXCL-1及CXCL-2mRNA高于I组(p<0.05),其差异有统计学意义。(2)I组和C组HO-1mRNA高于S组(p<0.05)；Z组HO-1mRNA低于S组(p<0.05)；C组HO-1mRNA高于I组和Z组(p<0.05)；Z组HO-1mRNA低于I组(p<0.05),其差异有统计学意义。5. Western blot结果：(1)I组和Z组TLR2、MyD88、p-ERK、p-c-Jun、Caspase-3及NF-κB蛋白表达水平高于S组(p<0.05)；C组TLR2、MyD88、p-ERK、p-c-Jun、Caspase-3及NF-κB蛋白表达水平低于S组、I组和Z组(p<0.05)；Z组TLR2、MyD88、 p-ERK、p-c-Jun、Caspase-3及NF-κB蛋白表达水平高于I组(p<0.05),其差异有统计学意义。(2)I组和C组p-p38蛋白表达水平高于S组(p<0.05)；Z组p-p38蛋白表达水平低于S组(p<0.05)；C组p-p38蛋白表达水平高于I组和Z组(p<0.05)；Z组p-p38蛋白表达水平低于I组(p<0.05),其差异有统计学意义。(3)S、I、C和Z组t-p38、t-ERK及p/t-JNK蛋白表达水平差异无统计意义(p>0.05)。6.组织病理学结果：S组肝小叶结构和肝细胞形态基本正常,门静脉周围有少量炎性细胞浸润；I组肝小叶结构紊乱,肝细胞广泛水肿,不同程度空泡样变性,部分肝细胞灶状坏死,嗜酸性增加；Z组肝小叶结构紊乱,肝细胞胞浆疏松,部分成气球样变与嗜酸性坏死,门静脉周用有大量炎性细胞浸润；而C组肝脏结构基本正常,肝细胞形态正常,门静脉周围有部分炎性细胞浸润。7.免疫组化CD3+T结果：HE染色S组无明显炎性细胞浸润,I组可见较多炎性细胞浸润,C组可见少量炎性细胞浸润,Z组可见大量炎性细胞浸润。其中细胞质内出现棕黄色染色即为CD3+T淋巴细胞,显示I组、C组和Z组肝组织中CD3+T表达高于S组,C组肝组织中CD3+T表达低于I组和Z组,Z组肝组织中CD3+T表达高于I组。结论：1.大鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型是一种稳定、可靠、简便的模型,可操作性强。2. CoPP诱导的HO-1高表达可以抑制肝脏缺血再灌注损伤后细胞坏死,从而减轻肝脏再灌注损伤,可能与下调TLR2表达有关。3.采用再灌注前使用ZnPP进行预处理,在肝脏缺血再灌注TLR2激活后,引起其胞内衔接蛋白MyD88、p-ERK、p-c-Jun及Caspase-3表达量增加,而采用再灌注前使用CoPP进行预处理后,MyD88、p-ERK、p-c-Jun及Caspase-3表达量减少。提示TLR2通过上调MyD88、p-ERK、p-c-Jun及Caspase-3表达参与肝脏缺血再灌注损伤的炎症反应机制。4.采用再灌注前使用ZnPP进行预处理,在肝脏缺血再灌注TLR2激活后,引起其胞内衔接蛋白p-p38表达量减少,而采用再灌注前使用CoPP进行预处理后,p-p38表达量增加。提示TLR2通过下调p-p38表达参与肝脏缺血再灌注损伤的炎症反应机制。5.在肝脏缺血再灌注中NF-κB被激活,并引起炎症因子IL-1β、IFN-γ、CXCL-1及CXCL-2的表达增加；而采用在灌注前使用CoPP进行预处理抑制TLR2激活后,NF-κB结合活性明显降低,炎症因子IL-1β、IFN-γ、CXCL-1及CXCL-2的表达也减少；说明HO-1可抑制TLR2激活,进一步通过抑制NF-κB的激活来下调炎症因子IL-1β、IFN-γ、CXCL-1及CXCL-2的表达。6.在肝脏缺血再灌注中TLR2介导的MyD88信号转导通路被激活,抑制TLR2后,可减轻肝脏缺血再灌注损伤中的炎症反应,说明大鼠肝脏缺血再灌注损伤中,HO-1可能是通过下调TLR2的表达,抑制TLR2-MyD88信号转导通路激活,减轻炎症因子的释放,从而起到保护肝脏缺血再灌注损伤。