黄芪对脓毒症大鼠肠道相关淋巴细胞凋亡的影响

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目的:观察黄芪对脓毒症大鼠肠道相关淋巴细胞凋亡的影响。方法:选择使用盲肠结扎并穿孔术复制脓毒症大鼠模型,将健康雄性SD大鼠72只(25020)g,随机分为3组,假手术组、黄芪治疗组和脓毒症组,在造模成功后的12h、24h、72h三个时间点分别留取肠集合淋巴结(PP结)、回盲部上段小肠及小肠粘液灌洗液,采用TUNEL检测PP结淋巴细胞的凋亡率;ELISA测定肠灌洗液IgA含量;免疫组化法观察肠固有层sIgA阳性细胞数量的变化以及PP结内淋巴细胞Caspase-3蛋白的阳性表达情况。结果:1、PP结淋巴细胞凋亡率假手术组在12h、24h及72h各时间点PP结内淋巴细胞均存在较低的凋亡率无显著差异(P>0.05);脓毒症组及黄芪治疗组在12h、24h、72h各时间点的PP结淋巴细胞凋亡率较假手术组均升高(P<0.05),12h最高,此后逐步降低,72h最低但较假手术组仍明显升高(P<0.05),且在各时间点脓毒症组较黄芪治疗组也有所升高(P<0.05),差异有统计学意义。2、肠固有层sIgA阳性细胞数量的变化假手术组在12h、24h及72h三个时间点的肠固有层sIgA阳性细胞数量变化无显著差异(P>0.05);脓毒症组及黄芪治疗组在12h、24h、72h各时间点的肠固有层sIgA阳性细胞数量较假手术组均减少(P<0.05),12h最少,此后逐步增加,72h最多与假手术组对比仍减少(P<0.05),且在各时间点脓毒症组的肠固有层sIgA阳性细胞数量也少于黄芪注射液治疗组(P<0.05),差异有统计学意义。3、PP结内淋巴细胞Caspase-3蛋白的阳性表达情况假手术组在12h、24h和72h各个时间点的PP结淋巴细胞Caspase-3蛋白均有较低的阳性表达,各时间点的积分统计无统计学意义(P>0.05);脓毒症组及黄芪治疗组在12h、24h及72h各时间点的PP结淋巴细胞Caspase-3蛋白阳性表达的积分与假手术组对比,均显著增高(P<0.05),12h最高,此后逐步降低,72h最低但仍高出数倍(P<0.05),且在各时间点脓毒症组较黄芪治疗组增高更加明显(P<0.05),差异有统计学意义。4、肠灌洗液IgA水平的变化假手术组在12h、24h及72h三个时间点的肠灌洗液IgA浓度比较无显著差异(P>0.05);脓毒症组及黄芪治疗组在12h、24h、72h各时间点的肠IgA水平均显著低于假手术组(P<0.05),12h最低,此后逐步升高,72h最高与假手术组对比仍明显下降(P<0.05),且在各时间点脓毒症组较黄芪治疗组也有所降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论:黄芪能有效抑制脓毒症大鼠肠道相关淋巴细胞的过度凋亡,保护肠道免疫屏障,具有改善脓毒症大鼠的肠道黏膜免疫功能。
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