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目的:该课题通过研究微小RNA(miRNA)在结直肠癌(CRC)中的表达情况,探讨miRNA作为CRC的诊断标记的潜能以及组织样本的临床特点对miRNA表达水平的影响。方法:该实验通过实时荧光定量聚合酶链式反应(实时定量PCR、qRT-PCR)对1547个miRNAs在CRC中的表达水平进行了检测分析,并对miR-490-5p和miR-363两个miRNA在具有不同临床特点的CRC中的表达情况进行分析研究。结果:通过配对t检验发现569个异常表达的miRNA(非配对t检验发现107个),对其中的miR-490-5p和miR-363在不同类型CRC中的表达水平的统计分析发现,它们在不同类型的CRC的表达情况并不完全一致:对不同分期CRC研究结果显示,miR-490-5p和miR-363在Ⅱ期CRC中的表达水平均有较大水平的下降,下降水平约为7倍,且P<0.05;Ⅲ期CRC中两者的下降水平同样超过6倍、P<0.05,但在Ⅳ期CRC中,虽然它们的下降程度也超过2倍,但是统计分析发现P>0.05,差异并不具有统计学意义。运用ROC(Recvier operatorcharacteristic curve,受试者特征曲线)分析miR-490-5p和miR-363筛查各分期CRC的敏感性及特异性,从ROC的敏感性、特异性、曲线下面积(Area under thecurve,AUC)及统计值(P值)等分析结果发现, miR-490-5p和miR-363能够比较好的将Ⅱ和Ⅲ的CRC患者从普通人群中筛查出来,AUC均超过0.70、P<0.05。但是在Ⅳ期CRC中,miR-490-5p的AUC小于0.70且P>0.05,而miR-363的AUC虽然达到0.778,但是因为其统计P值为0.275(>0.05),所以分析结果认为它们并不能很好的筛查Ⅳ期CRC。在对不同性别人群CRC的研究中发现:相对于正常样本,miR-490-5p和miR-363在男、女性肿瘤样本中的表达水平都下降超过5倍且P<0.05, ROC分析结果显示AUC均超过0.70、P<0.05。表明miR-490-5p和miR-363都能够比较好的将男性和女性CRC患者从正常人群中筛查出来。在对不同分化程度的CRC分析时发现:相对于正常样本,miR-490-5p和miR-363肿瘤样本中的表达水平虽然也有不同程度的下降,但在高分化CRC中的统计分析中发现它们的P值大于0.05,实验结果并不具有统计学意义。而在中分化CRC中的表达水平则下降了超过5倍,且P<0.05;ROC结果同样表明miR-490-5p和miR-363能将中分化CRC患者从正常人群中筛查出来(AUC均超过0.70、P<0.05)。然后我们分析了miR-490-5p和miR-363在不同组织部位来源(分别为直肠和结肠)的肿瘤中的表达情况,除miR-490-5p在直肠癌组织样本中的统计分析结果显示P>0.05,其他结果均为表达水平下降超过2倍且P<0.05;ROC表明miR-490-5p对直肠癌的筛查不理想(AUC小于0.70,且P>0.05);但miR-490-5p和miR-363对从正常人群中筛查结肠癌患者及miR-363筛查直肠癌患者选择却比较理想(AUC>0.70、且P<0.05)。最后我们将所有的肿瘤和正常组织样本分别作为一个整体,分析miR-490-5p和miR-363在混合组织中的表达水平,结果发现,miR-490-5p和miR-363在肿瘤组织中的表达水平相对于正常组织下降了超过6倍且P<0.05,ROC统计结果表明:miR-490-5p和miR-363能够比较好的将CRC患者从正常人群中筛查出来(AUC均超过0.70、且P<0.05)。结论:在CRC中存在多个明显异常表达的miRNA,miRNA在具有不同临床特点的CRC组织中的表达水平并不完全一致。作为CRC的临床诊断标记,需要从多个角度分析考虑。miR-490-5p和miR-363具有作为CRC诊断标记的潜能。