论文部分内容阅读
目的 建立CEA-mRNA实时荧光定量检测方法，并运用所建立的方法检测结直肠癌患者癌组织、淋巴结组织及外周血中CEA-mRNA的表达水平，探讨CEA-mRNA表达在结直肠癌中应用价值。 方法 应用所建立的CEA-mRNA实时荧光定量检测方法，对56例结直肠癌患者、30例结肠良性疾病患者及30例正常对照组的癌组织、淋巴结组织及外周血中CEAmRNA的表达水平进行了检测，同时检测了以上三组人群外周血CEA蛋白的水平表达，并分析了CEA mRN水平变化与结直肠癌患者Dukes不同分期、不同病理分化程度的关系，同时比较结直肠癌患者手术前后外周血CEA mRNA的表达变化，并与血清CEA蛋白含量进行了相关分析。 结果 1．以CEA cDNA质粒为标准品建立标准曲线，以GAPDH做内对照和SYBR GreenⅠ作为荧光染料，建立了CEA mRNA实时荧光定量检测方法。CEA和GAPDH的扩增效率分别为0.99和0.98。批内变异系数分别为2.0％和0.8％，批间变异系数分别为3.2％和3.9％。扩增产物电泳分析和熔解曲线分析表明该方法简便、特异、可靠，为后续实验奠定了基础。 2．CEA mRNA在所有的结直肠癌组织中均表达，整体表达水平为68.27±38.48，其表达水平在不同病理分化程度及Dukes分期中无明显变化(P＞0.05)；CEA mRNA在30