【摘 要】
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自然界的植物经常会遭受干旱、盐碱和低温等恶劣环境的危害,使其生长发育受到抑制,甚至导致植株死亡。这些非生物胁迫造成的危害已经成为农业增产、生态环境改善和实现可持续发展的重要限制因素。因此,阐明植物对非生物胁迫信号的应答机制,应用基因工程手段提高植物的抗逆性,以满足日益增长的人口对粮食的需求,已成为未来农业发展的关键和基础性工作。转录因子在植物逆境信号传递过程中发挥着
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自然界的植物经常会遭受干旱、盐碱和低温等恶劣环境的危害,使其生长发育受到抑制,甚至导致植株死亡。这些非生物胁迫造成的危害已经成为农业增产、生态环境改善和实现可持续发展的重要限制因素。因此,阐明植物对非生物胁迫信号的应答机制,应用基因工程手段提高植物的抗逆性,以满足日益增长的人口对粮食的需求,已成为未来农业发展的关键和基础性工作。转录因子在植物逆境信号传递过程中发挥着关键作用,一个转录因子可以同时调控多个下游基因的表达,从而提高植物的抗逆性。DREB是一类与逆境胁迫相关的转录因子,它能够识别并结合于干旱、高盐及低温胁迫相关基因启动子区域中的DRE顺式作用元件,启动下游抗逆基因的表达,从而在转录水平上调控多个抗逆基因。因此DREB类转录因子能够综合改良植物的抗逆性状,是较为理想的抗逆工程基因。赖草属LeymusHochst是禾本科Poaceae小麦族TriticeaeDumortier的一个重要多年生属,是小麦的三级基因源,有很多种是优良的牧草。赖草属植物通常生长于海滨、河湖沙岸、沙漠沙丘、草原草甸、山坡及林下。有些赖草属植物具有穗大、粒多和高光效等优良特性。同时,该属大多数植物具有较强的耐寒、耐旱、耐盐碱以及抗病、抗虫、抗风沙的能力。所以对赖草属植物抗逆性相关基因的研究为具有重要意义,为以后赖草属植物作为牧草、草坪草以及小麦等农作物的抗逆性遗传改良奠定基础。采用同源性克隆的方法,首次从多枝赖草中成功分离了编码DREB2蛋白的cDNA序列,命名为LmDREB2,在GeneBank中登录号为JQ755244。同时,克隆了15种赖草属植物DREB2蛋白的DNA序列。16种赖草属植物DREB2基因的序列全长都是834bp,含有一个完整的开放阅读框,长795bp,编码264个氨基酸。氨基酸序列分析表明赖草属植物DREB2转录因子含有一段核定位信号(NLS)、酸性活化区域(AAR)和63个氨基酸的DNA结合域(EREBP/AP2),属于EREBP/AP2基因家族。蛋白结构预测发现都具有一个α螺旋和3个β折叠.LmDREB2基因在基因组DNA的结构分析证明LmDREB2没有内含子。利用RT-PCR对LmDREB2基因进行组织特异性表达检测,结果表明LmDREB2基因在茎和叶中表达较高,而在根中的表达较弱。对16种赖草属植物的DREB2转录因子的核苷酸序列和氨基酸序列做比对分析,核苷酸序列的相似度为97.52%,氨基酸序列的相似度为97.04%。基于赖草属植物DREB2基因的系统树能把各物种很好的分开,能在已定程度上反应赖草属种间的系统关系。DREB2基因资料的赖草属植物系统关系与醇溶蛋白、RAPD和Acc1基因资料的赖草属植物系统基本一致。上述结果为进一步研究赖草属植物的抗逆性机制和应用基因工程手段改良小麦的抗逆性奠定了基础。
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