目的前列腺癌是美国男性中发生率最高的肿瘤,在致死肿瘤中排名第一。近年来,我国前列腺癌发病率增长迅速,已位居我国男性恶性肿瘤的第三位。尽管早期雄激素剥夺治疗有较好的疗效,但是在晚期大部分患者会发展成激素非依赖性前列腺癌,而无药可救。而中医药已成为治疗前列腺癌及延缓前列腺癌向雄激素非依赖转化的重要方法之一,并已取得一定疗效。中医认为前列腺癌的病机以肾虚为本,故多用补肾药配伍其他药物辨证治疗。但是,前列腺癌早期为雄激素依赖性,而某些补肾类中药可能有雄激素样作用,因而,能否用补肾类药物治疗前列腺癌就成为争议问题。补肾药促进还是抑制前列腺癌细胞的生长,是评价补肾药能否用于治疗前列腺癌的关键。淫羊藿(Epimediurn grandiflorum Morr)是临床常用的补肾中药,淫羊藿苷(ICariin,ICa)是淫羊藿属(Epimedium)植物中提取的总黄酮的一种主要活性成分。药理学研究表明,ICa对多种肿瘤细胞有抑制作用,但同时具有雄激素样作用,其对雄激素依赖性前列腺癌细胞的作用尚未见报道。故本研究以雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞为模型,观察淫羊藿苷的作用,并探讨其与雄激素受体(AR)相关的分子机制,为补肾中药淫羊藿在前列腺癌治疗中的应用提供实验依据。方法体外培养人前列腺癌细胞株LNCaP细胞,以不同浓度淫羊藿苷作用LNCaP细胞一定时间后,进行以下检测：1.淫羊藿苷对LNCaP细胞增殖的影响：MTT比色法测定不同浓度的淫羊藿苷对LNCaP细胞作用24h、48h后的增殖率,以十一酸睾酮为阳性对照药。2.淫羊藿苷对LNCaP细胞周期、细胞凋亡的影响：不同浓度的淫羊藿苷对LNCaP细胞作用48h后,用PI单染法流式细胞术分析细胞周期；用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术分析细胞凋亡的变化。3.淫羊藿苷对LNCaP细胞AR及PSA的影响：不同浓度的淫羊藿苷对LNCaP细胞作用48h后,western blotting检测AR蛋白表达,免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察AR核转位；western blotting检测PSA蛋白表达。4.淫羊藿苷对LNCaP细胞HER2-PI3K-Akt信号传导通路的影响：不同浓度的淫羊藿苷对LNCaP细胞作用48h后,westemblotting测定HER2、 p-HER2、 Akt和p-Akt的表达水平。结果1.阳性药物十一酸睾酮对LNCaP田胞增殖起双向调节作用,高浓度(10-5mol/L10-6mol/L、10-7mol/L)抑制细胞增殖,低浓度(10-8mol/L、10-9mol/L、10-10mol/L)促进细胞增殖；淫羊藿苷(浓度为10-6mol/L-10-9mol/L时)抑制细胞LNCaP增殖,浓度为10-6mol/L时,抑制率最高(31.98%,48h)。48h与24h相比,抑制率明显增加(P<0.05)。2.淫羊藿苷作用LNCaP细胞48h,细胞周期停滞在GO/G1期,阻止其进入s期,G2/M期无明显变化；LNCaP细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率均较低(淫羊藿苷浓度10-6mol/L时早期凋亡率为0.13%,晚期凋亡率为1.8%),说明淫羊藿苷无诱导LNCaP细胞凋亡的作用。3.淫羊藿苷(浓度为10-6mol/L时,相对比为0.24；对照组相对比为1.17)明显抑制LNCaP细胞AR蛋白的表达,并抑制AR发生核转位,而阳性药物十一酸睾酮明显促进AR核转位；淫羊藿苷(浓度为10-6mol/L～10-9mol/L)显著减少LNCaP细胞PSA蛋白的表达。4.淫羊藿苷(浓度为10-6mol/L～10-9mol/L)作用LNCaP细胞48h后,能显著降低p-HER2/HER2、 p-Akt/Akt的值,抑制HER2和Akt的活化。结论1.虽然淫羊藿苷在动物体内有一定的雄激素样作用,但在体外细胞实验中未发现其刺激雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞增殖的作用,相反,对LNCaP细胞具有一定的抑制增殖作用；淫羊藿苷对雄激素依赖性前列腺癌动物是否有促肿瘤增殖作用需进一步研究；2.淫羊藿苷对LNCaP细胞增殖的抑制作用与其降低AR蛋白表达,并抑制其核转位,从而抑制AR通路活化、减少其靶基因(PSA基因)活化有关。3.淫羊藿苷对LNCaP细胞增殖的抑制作用,还可能与HER2-PI3K-Akt信号通路活化的抑制有关。4.淫羊藿苷的作用对防止前列腺癌向雄激素非依赖性转化也有一定的意义。