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背景及目的:人脑胶质瘤多起源于神经胶质细胞,属于神经上皮源性肿瘤,约占中枢神经系统中所有肿瘤的27%;在颅内原发性恶性肿瘤中胶质瘤是最常见的,约占80%。胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM,WHOⅣ级)在整个中枢神经系统原发性恶性肿瘤中,发病率是最高的,占到46%左右,男性发病率高于女性。胶质瘤具有起病隐匿,生长迅速,恶性程度相对较高,无明显边界,且呈浸润性生长等特点,目前治疗效果总体欠佳,在颅内原发性肿瘤中,胶质瘤患者的病死率是最高的,仅有1年左右的中位生存时间。与所有恶性肿瘤一样,胶质瘤的发生发展是一个多步骤、多因素的过程,但目前确切的发生机制仍有待进一步研究;伴随着科学技术的进步,与胶质瘤发生发展密切相关的肿瘤抑制因子越来越多的被发现,这对于寻找针对胶质瘤的靶基因或靶蛋白,以及胶质瘤诊断分级分型、开发分子靶向药物和判断预后等具有极大的推动作用。在目前的研究基础上,已发现以下3条基因信号通路的异常可能是胶质瘤发生发展的部分因素,包括:EGFR/PTEN/PI3K途径,Rb-E2F/CDK4、6/P16-cyclin D途径,P53/MDM2/P12、P21途径。INPP4B基因是定位于人染色体4q31.21的一个潜在肿瘤抑制基因,其编码的产物为磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(INPP4B,inositol polyphosphate4-phosphatase type II),是一种脂质磷酸酶。根据已有的研究结果显示,作为一个潜在的肿瘤抑制因子,在许多恶性肿瘤中存在INPP4B的异常表达,如在白血病、乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤、肝癌、胃癌等恶性肿瘤中均发现INPP4B的表达缺失或表达异常。INPP4B主要使磷脂酰肌醇3,4-二磷酸(PI(3,4)P2)的D4位基团去磷酸化,其产物为3-磷酸磷脂酰肌醇(PI(3)P);而PI(3,4)P2能使AKT激活,当PI(3,4)P2降低时,则PI3K/AKT信号传导通路作用被抑制,从而INPP4B起到抑制肿瘤的发生。人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)是一个定位于染色体10q23.31,编码由403个氨基酸组成的具有磷脂和蛋白质的双重磷脂酶活性的蛋白。PTEN作为目前在肿瘤研究中较为火热的抑癌基因之一,其在细胞周期的调控、诱导细胞的凋亡以及细胞的迁移粘附等方面具有重要的调控作用。PTEN蛋白主要通过去磷酸化作用,使磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸(PI(3,4,5)P3)的D3位基团脱磷酸,来调节细胞内PI(3,4,5)P3水平,对PI3K/AKT途径进行负调控。本实验拟通过检测INPP4B与PTEN在人脑胶质瘤中的表达情况及二者的相关性,以期能在分子水平对胶质瘤发生发展机制作初步探讨,同时希望能对胶质瘤的诊断分级、预后判断及治疗等方面提供理论依据。方法:收集川北医学院附属医院神经外科2015年1月到2016年8月胶质瘤手术切除并且病理明确诊断的标本60例,其中男性患者33例,女性患者27例,Ⅰ级胶质瘤5例,Ⅱ级胶质瘤26例,Ⅲ级胶质瘤20例,Ⅳ级胶质瘤9例。以上胶质瘤标本均按照2007年WHO的中枢神经系统肿瘤分类分级来进行病理分类分级,所收集标本均有完整病历资料,且术前未进行放射治疗、化学治疗等抗肿瘤治疗。另外再收集正常脑组织标本25例作为对照分析(标本主要来源于脑外伤等高颅内压患者手术时切除的挫伤坏死脑组织)。所有标本切下后,立即予以4℃左右PBS液反复冲洗去除血液,清除坏死、电灼失活的组织,然后将标本一分为二,一份置于4%的多聚甲醛溶液中固定1到2日后石蜡包埋备用,另一份放于液氮中转移至实验室,然后置于-80℃冰箱中保存备用。采用免疫组织化学法(IHC)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分别测定正常脑组织和胶质瘤中INPP4B和PTEN的表达情况;并采用统计软件SPSS22.0对实验数据进行统计分析。结果:1免疫组化实验结果显示:INPP4B在正常脑组织组和低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组三组间表达差异有统计学意义(P<0.05);其阳性率:正常脑组织组中为92%,低级别胶质瘤组中为67.7%,高级别胶质瘤组中为37.9%;低级别胶质瘤组中INPP4B表达高于高级别胶质瘤组(P<0.05),正常脑组织组中INPP4B表达高于低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组(P<0.05)。PTEN在正常脑组织组和低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组三组间表达差异有统计学意义(P<0.05);其阳性率:正常脑组织组中为96%,低级别胶质瘤组中为74.2%,高级别胶质瘤组中为41.4%;低级别胶质瘤组中PTEN表达高于高级别胶质瘤组(P<0.05),正常脑组织中PTEN表达高于低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组(P<0.05)。2 qRT-PCR实验结果显示:INPP4B mRNA在正常脑组织组和低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组三组间表达差异有统计学意义(P<0.05),低级别胶质瘤组中INPP4B mRNA的表达水平低于正常脑组织组(P<0.05),高级别胶质瘤组中INPP4B mRNA的表达水平低于低级别胶质瘤组与正常脑组织组(P<0.05);PTEN mRNA在正常脑组织组和低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组三组间表达差异有统计学意义(P<0.05),低级别胶质瘤组中PTEN mRNA的表达水平低于正常脑组织组(P<0.05),高级别胶质瘤组中PTEN mRNA的表达水平低于低级别胶质瘤组与正常脑组织组(P<0.05);INPP4B与PTEN在正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤三组中表达成正相关,(r=0.752,P=0.000)。结论:1 INPP4B与PTEN的表达水平均与胶质瘤的恶性级别呈负相关,随着胶质瘤恶性程度的增高二者的表达水平降低,提示二者可能为胶质瘤的抑制基因。2 INPP4B与PTEN在胶质瘤中的表达水平具有正相关性,推测其可能在抑制胶质瘤的发生、发展、侵袭增殖等方面具有协同作用。3基于INPP4B与PTEN在胶质瘤中的表达具有相同的下降趋势,因此推断联合检测INPP4B与PTEN可能作为胶质瘤诊断分级、预后判断等方面的参考指标。