生长抑素(somatostatin，SST)及其类似物(somatostatin analogue，SSA)为一类对生长激素(growth hormone，GH)有抑制作用的小分子调节多肽。SST广泛分布于人体多种器官、组织中，不仅存在于下丘脑及分泌GH的脑垂体，也存在于与GH调节无关的某些组织。SST具有多种生理和药理效应，大量研究还提示SST／SSA具有抗肿瘤细胞增殖功能。所有SST或SSA这些配体功能的实现都是由细胞表面表达的生长抑素受体(somotastatin receptor，SSTR)介导的。研究发现多数具有胺前体摄取与脱羧作用、和神经内分泌功能的肿瘤上存在着高表达的SSTR，其中小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)同样存在大量的SST高亲和力结合位点。九十年代以来有关的研究进展迅速，SSTR的 第四军医大学博士学位论文5种亚型己被成功克隆。近年来在该研究领域的热点之一，是探索SST／SSA对SSTR亚型的调变规律。Lamberts等首先发现SST－14作为SSTR受体激动剂所产生的生物学效应具有时相性变化，急性给药时所产生的初期激动效应可被继续给药的“减敏”作用所取代，它与受休内化及磷酸化等生化过程有关川 等用SSTR15亚型基因分别转染CHO－KI细胞进行SST－14、SST－28对各亚型调变的研究，明确提出其动态调变作用可分为内化与上调。除SSTRI外，其余亚型在给予％T后15－60。让发生不同程度的内化：当将SST的作用时间延至22h时，SSTRI出现明显上调，其机理与受体C末端的信号转导显著相关。SSA使自身受体内化、上调的功能，可提高SSA靶向结合SSTR的效能，延长载入的放射性核素在瘤内的滞留时间，从而提高靶向治疗的辐射效应。目前国外报道的SSTR调变的结果仅局限于转染细胞或实体瘤细胞的离体研究。本研究拟观察SSA对SCLC细胞株SSTR的调变规律以便有助于设计靶向抑瘤的介入增效方案。由于SSA较SST有更强的抗降解能力，故国外若干实验室针对SSTR的不同亚型开发了多种SSA，其中RC．160优越的理化及生物学性能，使之成为本实验的首选。 本课题拟以 SCLC为研究对象，探索队－160致 SCLC细胞株 （1（C－H446）SSTR上调、内化规律，为增加 SCLC对放射性核素的摄取，及延长其在肿瘤部位的作用时间，为抑瘤增效模式提供理论依据。摸索动物荷 SCLC模型上核素标记的 RC－160的生物学分布及SSTR显像情况。预期通过本课题的探索，将为SCLC的受体介导靶向治疗的临床前研究提供有益的启迪。 实验方法： l、RC－160的碘标记采用氯胺 T法；RC－160 W标及镰标均采 5 第四军医大学博士学位论文用酒石酸亚锡法。 2、口‘I－RC－160 与高度表达 SSTR 的小细胞肺 癌细胞株 （NC－H446）的结合特性研究，及RC－160对NC工H446细胞生长抑素受体内化及调变的研究，采用体外受体放射分析法。 3、”be－RCJ 在正常小鼠及荷瘤鼠的生物学分布及小鼠SCLC 移植瘤的SSTR放射受体显像（RRI）的初步实验参照ZAMORA．P．0等报道的方法。 实验结果： l、纯化后”1－RC－160 标记率为92．00，比活度1．85TBq／mmol／L；＊’Re－RC－160的标记率为 96．2％，加抗坏血酸组的”’R＊－RC－16O 在常温下放置24h 后其放化纯仍为85．0％：“TC”－RC－16O的标记率为84．0％，标记物室温放置4小时后，放射化学纯度仍＞80．0％。 2、’抡I－RC－160与肌I－H446细胞的结合反应合适温度为 37C，合适的温育时间为60min；采用体外受体放射分析法，在受体定量的情况下，‘”I－RC－160与“I－H446细胞的特异性结合在一定范围内（0－0．25nmol／L）随着标记配体量的增加而上升，最终呈现出结合的可饱和状态；”I－RC－160与NC工H446的特异性结合反应的Kd为 1．71 10‘’mol／L，SCLC细胞膜上 SSTR的 Bmax为 1．06X 10o个／细胞；竞争结合实验中，RC－160的 IC。。为 1．58X 10－‘WhOI／L。 3、温育15min时，内化1组（含未标记RC－160 InM）、内化11组（含未标记 RC－1601 uM）和空白对照组（用不含 RC－160的配制液）的内化率分别为 22．3土 2．5％、8．2士 3．3％和 12．710．3％（内化I组与空白对照及内化11组比较，尸＜0．of）。随着时间的延长内化率有所下降，4h时内化1组、内化＊组和空白对照组的内化 6 第四军医大学博士学位论文率分别为 8．2土 l．2％、2．6土0．4％和 3．0土 0．5％。NCI－H446细胞暴露于低浓度（0．luM）的非标记RC－160，于暴露13h以前的SSTR上调率增加缓慢，其后随着时间的延长上调率迅速增加，于暴露19h时达到顶峰76．5土2．6％，其后又缓慢下降。 4、’R旷RC刁60在正常小鼠体内的分布实验提示，标记物很快由血液中清除到肝脏，然后清除到小肠，最后到结肠，24h时标记物基本全部清除到体外。‘’b旷RC刁60在肾脏组织浓?