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为提升红螯螯虾离体胚胎孵化效果,分别利用ZISS（一种气流带动水流使胚胎悬浮的设备）与自主研发的摇床孵化设备研究了氨氮、亚硝酸盐、p H等水质指标对离体胚胎孵化效果的影响及不同消毒方法、孵化密度、胚胎发育阶段、振动频率、水体循环周期对离体胚胎孵化效果和生理生化指标的影响。试验结果如下:1.不同氨氮、亚硝酸盐、pH对离体胚胎孵化的影响1)氨氮为0、0.2、0.6、2.0、3.5 mg/L时离体胚胎的孵化率分别为93.83%、90.67%、92.00%、95.83%、89.00%;出苗率分别为73.00%、76.83%、70.25%、49.00%、39.67%。各组孵化率均无显著性差异;氨氮为2.0、3.5 mg/L两组出苗率均显著低于其余三组。2)亚硝酸盐为0、0.05、0.25、0.6、1.25 mg/L时离体胚胎的孵化率分别为89.83%、86.67%、83.17%、83.83%、85.33%;出苗率分别为64.50%、54.50%、26.83%、15.67%、0%。各组孵化率均无显著性差异;亚硝酸盐为0、0.05 mg/L两组出苗率显著高于其余三组。3)p H为6.8、7.7、8.4、8.9、9.4时离体胚胎的孵化率分别为84.80%、84.67%、90.33%、85.00%、90.50%;出苗率分别为0%、68.83%、60.50%、40.50%、1.50%。p H 8.4、9.4两组孵化率显著高于其他三组;p H 7.7、8.4两组出苗率显著高于其他三组;回归方程分析结果显示最佳p H为8.1。2.不同消毒方法、孵化密度、胚胎剥离阶段、振动频率、水体循环周期对离体胚胎孵化的影响1)离体胚胎分别应用3000 ppm甲醛消毒15min、75%乙醇消毒30s、3000ppm溴硝丙二醇消毒15min和3000 ppm过氧化氢消毒10min处理,经过6～10d孵化,孵化率分别为94.73%、91.72%、90.17%、93.83%;经过19～23d出苗,出苗率分别为61.94%、55.00%、54.88%、54.40%。各组的孵化率与出苗率无显著性差异,甲醛组出苗率最高。2)离体胚胎以300、400、500粒/盒的孵化密度经过6～8d孵化,孵化率分别为90.33%、94.73%、88.47%;经过19～21d出苗,出苗率分别为56.22%、61.94%、62.47%。各组的孵化率均无显著性差异,500粒/盒组出苗率显著高于其他两组。3)离体胚胎分别在五对附肢期、七对附肢期、复眼色素形成期剥离,经过15～16d、11～14d、6～7d孵化,孵化率分别为80.67%、95.41%、96.92%;经过28d、23～26d、19～20d出苗,出苗率分别为42.63%、59.40%、61.43%。七对附肢期与复眼色素形成期两组之间的孵化率与出苗率无显著性差异,但均显著高于五对附肢期组。4)振动频率分别为11次/min、16次/min、26次/min,离体胚胎经过10d孵化,孵化率分别为93.58%、93.58%、92.17%;经过23d出苗,出苗率分别为75.67%、63.75%、59.00%。各组孵化率均无显著性差异,但11次/min组的出苗率显著高于另外两组。5)孵化用水的循环周期分别为7.1次/h、4.8次/h、2.1次/h,离体胚胎经过6～8d孵化,水体循环周期的孵化率分别为95.92%、93.58%、92.88%;经过19～21d出苗,出苗率分别为65.77%、65.67%、66.58%。各组孵化率与出苗率均无显著性差异。3.不同消毒方法、孵化密度、胚胎剥离阶段、振动频率、水体循环周期对离体胚胎生理生化指标的影响1)消毒方法试验中,抗氧化指标结果显示,胚胎阶段,甲醛组的SOD显著高于乙醇组和过氧化氢组,各组的MDA均无显著性差异;幼虾阶段,各组的SOD均无显著性差异,但溴硝丙二醇组的MDA显著高于其他三组,乙醇组的MDA则显著高于甲醛组与过化氢组。免疫相关指标结果显示,胚胎阶段,过氧化氢组的ACP显著高于其他三组,乙醇组的ACP显著低于其他三组,甲醛组与过氧化氢组的AKP显著高于乙醇组;幼虾阶段,溴硝丙二醇组的ACP显著高于其他三组,AKP显著低于其他三组。消化酶结果显示,胚胎与幼虾阶段各组的α-淀粉酶均无显著性差异。2)孵化密度试验中,抗氧化指标结果显示,胚胎与幼虾阶段各组的SOD均无显著性差异。免疫相关指标结果显示,胚胎阶段,400粒/盒组的AKP显著高于其他两组,但三组的ACP均无显著性差异;幼虾阶段,各组的ACP、AKP均无显著性差异。消化酶结果显示,胚胎与幼虾阶段各组的α-淀粉酶均无显著性差异。3)胚胎发育阶段试验中,抗氧化指标结果显示,胚胎阶段,各组的SOD均无显著性差异;幼虾阶段,五对附肢期组的MDA显著高于七对附肢期与复眼色素形成期组。免疫相关指标结果显示,胚胎阶段,各组的AKP均无显著性差异,复眼色素形成期组的ACP显著高于五对附肢期与七对附肢期组;幼虾阶段,各组的ACP、AKP均无显著性差异。消化酶结果显示,胚胎阶段,复眼色素形成期组的α-淀粉酶显著高于五对附肢期与七对附肢期组;幼虾阶段,各组的α-淀粉酶均无显著性差异。4)振动频率试验中,抗氧化指标结果显示,胚胎阶段,各组SOD、MDA均无显著性差异;幼虾阶段,各组MDA均无显著性差异,但11次/min组的SOD显著高于26次/min组。免疫相关指标结果显示,胚胎阶段,11次/min组的ACP、AKP均显著高于26次/min组;幼虾阶段,11次/min组的ACP、AKP均显著高于其他两组。消化酶结果显示,各组间的α-淀粉酶均无显著性差异,11次/min组的α-淀粉酶活性略高于其他两组。5)水体循环周期中,抗氧化指标结果显示,各组SOD、MDA均无显著性差异。免疫相关指标结果显示,胚胎阶段,各组的ACP、AKP均无显著性差异;幼虾阶段,各组的ACP均无显著性差异,但4.8次/h组的AKP显著低于其他两组。消化酶结果显示,各组的α-淀粉酶均无显著性差异。总之,适宜离体胚胎孵化的氨氮为0～0.6mg/L,亚硝酸盐为0～0.05 mg/L,p H为8.1;适宜的孵化密度、胚胎剥离阶段、振动频率分别为400～500粒/盒、七对附肢期与复眼色素形成期、11次/min。