层迭灵芝（Ganoderma lobatum）是灵芝属树舌亚属中的一个种，本研究首次对其子实体的化学成分进行分析，发现与药典中常用的赤芝相比，层迭灵芝中三萜化合物种类较少但含量较高，其糖醇、核苷、蛋白质和氨基酸含量较赤芝丰富。层迭灵芝的醇提物对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制活性，水提物也具有体外免疫活性。　　采用中高压制备液相对层迭灵芝子实体中的三萜类化合物分离纯化，通过紫外、质谱、核磁等检测方法，解析得到7个三萜类化合物，分别为树舌环氧酸A、树舌环氧酸C、树舌环氧酸E、树舌环氧酸F、树舌环氧酸G、树舌环氧酸H和20-Hydroxy-3，12，15，23-tetraoxolanosta-7，9(11)，16-trien-26-oic acid。以上化合物均为首次从层迭灵芝中分离得到。对7个化合物进行体外活性研究，发现20-Hydroxy-3，12，15，23-tetraoxolanosta-7，9(11)，16-trien-26-oic acid对肿瘤细胞L1210的增殖具有良好的抑制效果，其增殖抑制的IC50值达到6.72μg/mL。　　采用Fortis Speed Core-C18色谱柱，UV二极管阵列检测(252nm)，0.01％冰醋酸-水(V/V)梯度洗脱，建立了以灵芝酸A为参比的17种三萜化合物的一测多评的高效液相色谱分析方法。方法学验证结果显示，所有校准曲线在测试范围内线性良好(R2＞0.9999)，LOD和LOQ分别低于2.52ng和6.43ng。日内，日间RSD分别在3个水平上均小于3.12％，回收率为91.4％-103.0％。将该方法应用于多种灵芝中三萜类化合物的质量评价，并将计算结果与外标法对比，发现两者结果基本一致。此外，利用该方法对不同种灵芝进行聚类分析，从化学分类学的角度揭示了灵芝品种间的相互关系和分类学位置。该一测多评分析方法，因具有节省检测时间和三萜标准品的特点，因此有利于HPLC的分析方法在灵芝及其相关产品的质量控制中的广泛应用。