柴胡、连翘的质量评价研究

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目的:柴胡和连翘为我国重要的药材,在我国有悠久的药用历史。目前,国内外学者在柴胡和连翘的栽培、化学、药理、临床等方面已做了大量的研究,取得了丰硕的成果,为柴胡、连翘资源的开发利用和合理保护奠定了基础。由于柴胡、连翘没有统一的质量控制标准,目前仍存在品种混乱、药用部位使用混乱等问题。在我国,不同地区在使用柴胡的部位方面不尽相同,北方地区习用地下部分,西南地区习用全草,而在华东和华南地区则两者并用。柴胡和连翘的各个部位所含的化学成分不同,柴胡地下部分的主要成分是皂苷类,而地上部分的主要成分是黄酮类。目前,对连翘的研究主要集中在连翘果实上,而对连翘花和连翘叶的利用尚未完全开发出来,文献研究已证实,连翘叶、花、种子也有很高的药用价值。青翘和老翘的化学成分具有一致性,但是含量差异显著,不能混用。因此,建立完善的、可靠的质量评价体系对规范、更合理地利用柴胡和连翘资源至关重要。2010年版《中国药典》对柴胡根、连翘果实的外部形态性状进行了描述;确定了TLC定性鉴别方法;确定了HPLC定量鉴别方法;对药材水分、总灰分、酸不溶性灰分与醇溶性浸出物含量进行了限定。但药典中没有柴胡总皂苷的含量测定项及指纹图谱研究,本课题来源于邯郸市科技技术研究与发展计划项目“邯郸道地中药材种质资源调查及产业化的研究”(编号:1113108018),将针对以上不足,对来源于太行山区不同产地、不同采集时间的柴胡及连翘不同部位样品进行系统的研究,优化了薄层定性鉴别条件,建立柴胡总皂苷的测定方法,并对柴胡、连翘药材的指纹图谱进行研究,对评价柴胡和连翘的道地性积累数据,旨在进一步完善柴胡和连翘药材的质量标准。方法:利用薄层定性鉴别法对不同产地、不同采集时间的柴胡(地上及地下部分)、连翘(果实、茎、叶)进行研究,优化薄层鉴别条件;采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定柴胡地下部分中总皂苷和柴胡皂苷a、d的含量,及连翘果实中连翘苷、连翘酯苷的含量;采用高效液相色谱法分别建立柴胡和连翘药材的指纹图谱。结果:1.通过反复筛选展开系统,优选出了柴胡(地上及地下部分)、连翘(果实、茎、叶)的薄层鉴别条件:柴胡地下部分:氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)(下层溶液);柴胡地上部分:氯仿-甲醇-甲酸(7:2:1);连翘果实、茎、叶:氯仿-甲醇(8:1)。2.对17批不同产地、不同采集时间的柴胡地下部分中总皂苷、柴胡皂苷a、d进行了含量测定,发现不同产地、不同采集时间的柴胡样品中总皂苷及柴胡皂苷a、d的含量差异显著,柴胡皂苷a、d高者,总皂苷不一定高,反之亦然。3.对12批不同产地、不同采集时间的连翘果实中连翘苷、连翘酯苷进行了含量测定,发现不同产地、不同采集时间的连翘样品中连翘苷和连翘酯苷A的含量差异明显,青翘中连翘苷的含量明显高于老翘。4.分别建立了柴胡和连翘药材的特征指纹图谱,17批柴胡和12批连翘药材特征指纹图谱存在一定的共性,17批柴胡样品有11个共有峰,12批连翘样品有12个共有峰,二者的共有峰的相对保留时间基本一致,而相对峰面积比值差异较大,且其中几批样品中部分色谱峰缺失。结论:本研究所建立的薄层鉴别条件,含量测定方法,HPLC指纹图谱,数据可靠,对评价柴胡和连翘药材的道地性积累数据,旨在进一步完善柴胡和连翘药材的质量标准。
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