恶性肿瘤曾作为“不治之症”在肆意吞噬人们的生命，直到本世纪初，人类对它仍束手无策。时至今日，随着肿瘤研究的不断发展，新型药物不断涌现，治疗方案不断更新。这些药物和治疗方案在一定程度上提高了患者的病情缓解率和长期生存率，但是仍有不少患者由于肿瘤复发而死亡。近年来的研究表明，通过合理的综合治疗，许多恶性肿瘤的治疗效果令人非常满意。如将传统的化疗或者放疗策略联合抗血管治疗等，可以产生更好的效果。CXC趋化因子配体10(CXCL10)，又名γ干扰素诱导蛋白-10(IP-10)。已有的研究表明，CXCL1O不仅可以趋化T细胞、单核细胞以及NK细胞等，具有一定的抗肿瘤免疫作用，而且还是一种有效的血管生成抑制剂。之前的研究发现，单独使用CXCL1O蛋白或基因治疗可以在一定程度上抑制肿瘤的生长，而将它与化疗药物联合使用明显地提高抗肿瘤效果，但并不能造成肿瘤的完全消退，提示需要寻找更有效的综合治疗方案。热疗治疗肿瘤是一种古老的抗肿瘤方法，其抗肿瘤作用的生物学机制是多方面的。热疗除了可以通过肿瘤细胞的热敏感性直接杀伤肿瘤细胞外，近年来的研究表明，热激产生的热休克蛋白可作为肿瘤抗原多肽的伴侣，通过介导树突状细胞的成熟，从而激活机体免疫系统以消除体内肿瘤细胞。最近Cristina Roca等人的研究表明，热疗还具有抑制血管生成的作用，暗示着热疗可以增强其它抑制血管生成药物的抗肿瘤效应。本研究设想CXCL10联合热疗可以产生增强或协同抗肿瘤作用。本研究中，我们利用克隆有CXCL1O基因的pET-32(a)表达载体表达重组蛋白，根据重组蛋白带His-tag标签，利用亲和层析的方法纯化重组蛋白，用肠激酶切割除去融合肽后再次进行纯化。重组蛋白复性之后通过淋巴细胞趋化活性分析检测CXCL10的生物活性。为了便于热疗，在BALB／c小鼠腿部建立了MethA肿瘤模型，待肿瘤长起来之后，将荷瘤小鼠随机分为CXCL1O+热疗组；CXCL10组；热疗组以及PBS对照组。CXCL10按25μg／Kg／day，连续瘤内多点注射20天。热疗(42℃，1小时)，于CXCL10开始治疗后的第6，12天使用。观察小鼠肿瘤体积和生存时间。为了进一步探讨其作用机理，在治疗结束后的第一天处死小鼠，取肿瘤组织作病理分析。通过CD31免疫荧光观察肿瘤血管生成情况，HE染色检测组织坏死情况，TUNEL法检测肿瘤组织细胞坏死，同时检测了治疗可能产生的副作用。结果表明，经纯化、切割及复性的重组蛋白，通过淋巴细胞趋化活性分析表明其具有较高的生物活性，可用于动物实验研究。动物实验结果发现单独CXCL10或热疗均可抑制肿瘤的生长，但联合治疗组的小鼠肿瘤完全消退。往这些肿瘤消退的小鼠身上重新接种同种肿瘤细胞，结果没有一只小鼠长出肿瘤，而用CD4、CD8的抗体剔除淋巴细胞之后，这些小鼠身上可以长出肿瘤，表明这种抗肿瘤免疫反应依赖于CD4~*、CD8~+的淋巴细胞。HE组织学切片染色结果显示联合治疗组的肿瘤坏死面积明显大于其它组，淋巴细胞浸润明显增多。CD31免疫组化染色表明，单独CXCL10或热疗均可抑制血管的生成，但联合治疗组的新生血管数明显少于对照组。进一步用TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡情况，我们观察到联合治疗组的肿瘤组织中的凋亡细胞数量明显高于其它组。综上所述，CXCL10联合热疗可以有效地抑制肿瘤生长，延长小鼠的生存时间，有效地抑制血管生成，增强诱导肿瘤细胞凋亡的作用，并且激活机体的细胞免疫反应。暗示这种联合治疗具有协同作用，可为肿瘤治疗提供新的思路。