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弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种专性细胞内寄生原虫,可感染包括人在内的所有哺乳动物。弓形虫病可导致严重的公共卫生问题和广泛的经济损失。弓形虫微线体蛋白3(Microneme protein 3, MIC3)是一种分泌型黏附素,黏附在宿主细胞和寄生虫的表面,在弓形虫的速殖子、缓殖子和子孢子期均能表达。具有作为诊断和免疫的双重潜在价值。根据已发表的弓形虫RH株MIC3的基因序列设计引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增MIC3基因,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。将重组质粒转染BHK-21细胞。间接免疫荧光染色证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液及上清样品中各有一条约39.2 ku的条带,可被山羊抗弓形虫高免血清所识别,大小与预测值相符。表明真核表达质粒pcDNA3-MIC3中的MIC3基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。重组质粒pcDNA3-MIC3肌肉注射免疫BALB/c小鼠后,通过ELISA检测血清特异抗体;经腹腔攻击感染弓形虫GJS株速殖子,观察小鼠的生存时间。免疫组小鼠血清特异性抗体较对照组差异极显著(P<0.01);攻击感染后免疫组小鼠平均存活时间较对照组明显延长。表明该核酸疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。本研究为弓形虫病诊断和疫苗研制提供了候选抗原。