罗格列酮诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡过程中hTERT表达变化的研究

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Sqiwei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察罗格列酮对卵巢癌细胞株SKOV3细胞的凋亡作用,对其作用机制进行初步的探讨,为今后罗格列酮作为抗肿瘤药物的临床应用提供理论和实验依据。  方法:本实验中所用的细胞株:卵巢癌SKOV3细胞(购自中科院细胞库)。实验共分六组:A组:罗格列酮25μmol/L组;B组:罗格列酮50μmol/L组;C组:罗格列酮100μmol/L组;D组:罗格列酮200μmol/L组;E组:溶媒对照组;F组:空白对照组(RPMI-1640)。1.使用倒置相差显微镜观察药物作用前后卵巢癌SKOV3细胞形态变化。2.药物作用24h、48h后,流式细胞术结合AnnexinV-FITC/PI双染检测卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况。3.药物作用48h后,免疫荧光法检测hTERT蛋白表达的变化,RT-PCR法检测hTERT基因表达变化。  结果:1.罗格列酮可以诱导卵巢癌细胞SKOV3发生凋亡,倒置相差显微镜观察到卵巢癌细胞出现凋亡征象,细胞变圆,胞浆固缩,细胞间隙增宽,部分细胞脱壁并漂浮。2.流式细胞仪检测SKOV3细胞凋亡率,结果显示罗格列酮作用24h后随着加药浓度的增高凋亡率明显增加,罗格列酮200μmol/L组凋亡率为21.49±1.10%,且药物作用48h后凋亡更加明显,罗格列酮200μmol/L组凋亡率达到34.61±0.82%。随着药物作用浓度的增加,凋亡率呈明显的浓度依赖性,且48h后凋亡率增加更加显著。3.罗格列酮作用48h后免疫荧光检测结果显示卵巢癌SKOV3细胞中hTERT蛋白表达下调,RT-PCR结果显示hTERT mRNA的表达也下调,同时表现出浓度依赖性。  结论:1.罗格列酮可以诱导体外培养的人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡,具有浓度依赖性。2.罗格列酮能明显下调hTERT在蛋白和基因水平的表达。3.罗格列酮诱导人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡的机制可能与hTERT、下调有关。
其他文献
目的:  分别检测细胞粘附分子(E-cadherin)和囊性纤维化转导调控因子(CFTR)在生育、不育人群精子上的表达及定位,探讨其是否可作为精子质量的监测指标,并为研究新的避孕药提供理论
目的:探讨晚期角质化包膜蛋白1B(Late cornified envelope1B,LCE1B)、LCE1C、LCE3A、LCE3D的基因多态性是否与中国内蒙古地区蒙古族寻常型银屑病存在遗传关联性。  方法:收集305
目的:研究七氟烷后处理对不同病程糖尿病大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的影响。  方法:72只雄性SD大鼠随机分成6组(n=12):非糖尿病缺血再灌注组(I/R组)、非糖尿病七氟烷后处理组