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目的:本课题从分子生物水平入手,探究宁夏密点麻蜥身体不同部位含药血清干预人胃癌细胞MGC-803的作用及其机制,为临床治疗胃癌提供科学用药依据。方法:实验分为8组:生理盐水组、华蟾素片组、5-Fu组、宁夏密点麻蜥头部组、宁夏密点麻蜥四肢组,宁夏密点麻蜥躯干组、宁夏密点麻蜥全身组、宁夏密点麻蜥尾巴组,每组20只(SPF级雄性SD大鼠)。各组分别给予相应药物,连续灌胃或尾静脉注射1周后,在无菌环境下腹主动脉取血离心制备含药血清,将其与细胞培养液以比例混合后干预人胃癌MGC-803细胞。采用MTT法测定经宁夏密点麻蜥身体不同部位含药大鼠血清干预后体外培养的胃癌MGC-803细胞的OD值计算细胞增殖率;AnnexinV-FITC/PI双染法和流式细胞仪检测各组含药血清对MGC-803细胞凋亡和周期的影响;Western-Blot法检测各组含药血清干预胃癌MGC-803细胞SIRT1、P53后蛋白表达水平。采用SPSS22.0For Windows软件进行统计分析,Graph Pad Prism6.0软件处理图像。结果:1.MTT法检测细胞增殖:与生理盐水组(A组)比较,各药物干预组细胞活力均降低,(P<0.05);与5-Fu组(B)、华蟾素片组(C组)比较,宁夏密点麻蜥各组细胞活力降低,细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.05);宁夏密点麻蜥头部组(D组)、宁夏密点麻蜥四肢组(E组)、宁夏密点麻蜥躯干组(F组)、宁夏密点麻蜥全身组(G组)、宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)混合比较,各组细胞活力依次降低,以宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)细胞活力最低,细胞增殖能力最低(P<0.05)。2.AnnexinV-FITC/PI双染法对细胞凋亡的影响:与生理盐水组(A组)比较,各药物血清干预组细胞总凋亡率明显增加(P<0.05);宁夏密点麻蜥头部组(D组)、宁夏密点麻蜥四肢组(E组)、宁夏密点麻蜥躯干组(F组)、宁夏密点麻蜥全身组(G组)、宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)各组细胞总凋亡率大于5-Fu组(B)、华蟾素片组(C组)(P<0.05);宁夏密点麻蜥头部组(D组)、宁夏密点麻蜥四肢组(E组)、宁夏密点麻蜥躯干组(F组)、宁夏密点麻蜥全身组(G组)、宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)混合比较,凋亡率依次增大,以宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)凋亡率最明显(P<0.05)。3.流式细胞仪检测细胞周期:与生理盐水组(A组)比较,各药物血清组均能将细胞阻滞于S期(P<0.05);宁夏密点麻蜥各部分组S期细胞比例大于5-Fu组(B)和华蟾素片组(C组)(P<0.05);宁夏密点麻蜥头部组(D组)、宁夏密点麻蜥四肢组(E组)、宁夏密点麻蜥躯干组(F组)、宁夏密点麻蜥全身组(G组)、宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)混合比较,各组S期细胞比例依次增大,以H组S期细胞比例最大(P<0.05)。4.Western-Blot检测人MGC-803胃癌细胞SIRT1、P53表达水平:各药物干预组与生理盐水组(A组)比较,SIRT1、P53的灰度值均有不同程度降低(P<0.05);宁夏密点麻蜥身体各部位组与5-Fu组(B)、华蟾素片组(C组)相比较灰度值均有所降低(P<0.05);宁夏密点麻蜥头部组(D组)、宁夏密点麻蜥四肢组(E组)、宁夏密点麻蜥躯干组(F组)、宁夏密点麻蜥全身组(G组)、宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)混合比较,各组灰度值依次降低,以宁夏密点麻蜥尾巴组(H组)SIRT1、P53的灰度值最低(P<0.05)。结论1.宁夏密点麻蜥身体不同部位含药大鼠血清能够抑制人MGC-803胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,促进细胞周期停滞在S期。2.宁夏密点麻蜥身体不同部位含药大鼠血清能够降低人胃癌MGC-803细胞SIRT1、P53蛋白表达,通过影响SIRT1对P53蛋白的去乙酰化作用,而影响癌变进展,发挥抑制肿瘤增长作用。3.宁夏密点麻蜥身体各部位含药大鼠血清对人胃癌MGC-803细胞的干预作用明显,以宁夏密点麻蜥尾巴组效果最明显。