口腔鳞状细胞癌分泌的胞外体对其生物学行为的影响

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目的:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma)是口颌系统中经常发生的恶性癌变,极其严重的危害着人类的健康。本实验将通过口腔鳞状细胞癌细胞细胞株(OSC-3、OSC-4)分泌的胞外体,研究其对细胞生物学行为的影响。方法:分别培养OSC-3、OSC-4两种类型的口内鳞状细胞癌细胞,从OSC-3、OSC-4的上清培养液中分离提纯胞外体(exosome,EXO),取正常的OSC-3和OSC-4作为对照组,有胞外体作用后的OSC-3和OSC-4作为实验组。使用免疫金标技术找到胞外体膜上的CD9。将提取的胞外体作用于OSC-3和OSC-4,MTT实验分别检测胞外体对OSC-3和OSC-4增殖能力的影响;细胞划痕实验各自观察胞外体对OSC-3和OSC-4迁移能力的结果;transwell小室侵袭实验分别检测胞外体对OSC-3和OSC-4侵袭能力的作用。结果:细胞上清液提取物免疫金标结果可见金标记的CD9,即分离提纯物为胞外体;MTT检测结果显示胞外体作用后的OSC-3和OSC-4的增殖能力24h、48h、72h组均增强(P<0.05);细胞划痕实验结果显示胞外体作用后的OSC-3和OSC-4的迁移能力增强(P<0.05);Transwell实验结果表明加入胞外体组的OSC-3和OSC-4的细胞被染色的数量明显多于对照组,对细胞计数后进行统计学分析,OSC-3和OSC-4加入胞外体组侵袭细胞的数目明显多于对照组,显示其侵袭能力也增强(P<0.05)。结论:OSC-3和OSC-4分泌的胞外体可以促进口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移、浸润能力。
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