【摘 要】
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目的:1、探讨睾酮对PCOS（多囊卵巢综合征）患者卵巢颗粒细胞自噬的影响;2、研究SENP3是否参与了睾酮诱导的自噬以及对细胞功能的影响;3、探讨在氯喹、SENP3敲低以及睾酮的同时作用下细胞自噬以及细胞功能的变化。方法:1、分别应用Western和细胞免疫荧光检测PCOS与对照组卵巢颗粒细胞中自噬蛋白和SENP3的表达与定位;2、以不同浓度和不同时间下的睾酮处理KGN细胞,Western检测自噬
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（编号:81671520）；
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目的:1、探讨睾酮对PCOS（多囊卵巢综合征）患者卵巢颗粒细胞自噬的影响;2、研究SENP3是否参与了睾酮诱导的自噬以及对细胞功能的影响;3、探讨在氯喹、SENP3敲低以及睾酮的同时作用下细胞自噬以及细胞功能的变化。方法:1、分别应用Western和细胞免疫荧光检测PCOS与对照组卵巢颗粒细胞中自噬蛋白和SENP3的表达与定位;2、以不同浓度和不同时间下的睾酮处理KGN细胞,Western检测自噬蛋白LC3BII/I,SQSTM1/p62,功能蛋白CYP19A1以及SENP3的表达,CCK-8检测细胞活性;3、SENP3敲低和过表达之后以10μΜ浓度的睾酮分别处理KGN细胞0 h、6 h、12 h和24 h,Western检测自噬蛋白LC3BII/I,SQSTM1/p62,功能蛋白CYP19A1以及SENP3的表达;4、在SENP3敲低、氯喹和睾酮同时存在的条件下,Western检测自噬蛋白LC3BII/I,SQSTM1/p62,功能蛋白CYP19A1以及SENP3的表达。结果:1、Western结果显示PCOS卵巢颗粒细胞自噬增强（LC3BII/I增加）,SENP3表达降低,并且细胞免疫荧光结果显示SENP3定位与细胞核,但是高度凝集在核仁中;2、睾酮以时间和浓度依赖性方式诱导KGN细胞使其自噬增强、SENP3和芳香化酶CYP19A1的表达降低,但是细胞活力并无明显改变;3、SENP3敲低提高了LC3B-II的水平,睾酮诱导后自噬和芳香化酶的变化趋势明显增强,这种增强的自噬反应和雌激素信号减弱显然是氯喹治疗的效果;4、SENP3过表达之后减弱了睾酮对KGN细胞自噬以及芳香化酶的影响。结论:1、患有PCOS的女性卵巢颗粒细胞显示自噬激活能力增强但是SENP3的表达降低;2、高雄激素血症导致PCOS自噬增强,通过下调颗粒细胞中的SENP3并且降低了雌激素的信号传导;3、SENP3是自噬的负调节剂,SENP3和de SUMOylation可能参与PCOS的病理机制,并且成为PCOS的潜在治疗靶点。
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