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黄芩苷(Baicalin)是从中药黄芩中提取的一种黄酮类化合物,具有明显的促进胚泡着床和保胎作用,已经广泛应用于临床。目前对于黄芩苷保胎作用机理的认识主要有以下几方面:第一,黄芩苷可以直接或间接调节哺乳动物体内Thl与Th2型免疫细胞的细胞因子含量,使机体免疫平衡向有利于胚泡附着的方向倾斜;第二,对体内雌、孕激素含量及其受体起到一定的影响作用,改善子宫内膜的生理环境,为胚泡的植入创造有利条件;第三,对多种因素引起的子宫平滑肌收缩有一定的抑制作用,减少了因为早期胚泡着床不稳定而造成的流产。但是,黄芩苷是否通过与胚泡着床有密切联系的Wnt通路发挥作用,目前还未见报道。妊娠是一个调动机体多方面生理机能的复杂生物学过程,为了更加深入的探究黄芩苷发挥保胎作用的分子机理,我们开展了本次实验。实验选取了性成熟、体成熟的昆明系雌、雄小白鼠,将成功交配的雌鼠记为妊娠第1天并随机分为四组:空白对照组、黄芩苷组、米非司酮组及黄芩苷+米非司酮组。于妊娠d2-8天,黄芩苷组小鼠给予黄芩苷,米非司酮组给予米非司酮,黄芩苷+米非司酮组给予黄芩苷和米非司酮,空白对照组则给予黄芩苷和米非司的溶剂。在妊娠d8进行妊娠率与着床胚泡数的统计。于妊娠d3-8天,采集血液样本,采用放射免疫法检测小鼠血清中雌二醇和孕酮的含量;采集子宫组织,抽提总RNA,采用qRT-PCR法检测β-catenin、LRP6、Dkk1和Wnt4基因相对表达水平;提取子宫组织总蛋白,采用Western-blotting法检测β-catenin、LRP6、Dkk1和Wnt4蛋白表达水平。结果表明黄芩苷引起围着床期的小鼠血清中雌二醇含量下降(P<0.05),抑制给予米非司酮引起的雌二醇含量的升高(P<0.01)。黄芩苷使围着床期小鼠血清中孕酮含量升高(P<0.05),改善因米非司酮引起的孕酮含量的降低(P<0.05)。与对照组相比,黄芩苷引起子宫组织中]Dkk1mRNA表达水平在d4-8显著降低(P<0.05),而Wnt4mRNA水平在d3-8显著升高(P<0.01);β-catenin mRNA表达水平在d3-8显著升高(P<0.01); LRP6mRNA表达水平在d3-7显著升高(P<0.01)。Western-blotting实验结果表明,黄芩苷使小鼠子宫组织中β-catenin蛋白表达量在d4-7显著升高(P<0.05),LRP6在d4-8显著升高(P<0.05),Dkk1在d6-8显著下降(P<0.05)。本研究运用米非司酮建立了小鼠胚泡着床障碍的模型,探讨了黄芩苷对小鼠妊娠率和着床胚泡数、围着床期小鼠血清中雌二醇和孕酮水平、子宫组织中经典Wnt信号通路相关物质(β-catenin、LRP6、Dkk1和Wnt4) mRNA及蛋白表达水平的影响,发现黄芩苷可能是通过影响血清雌、孕激素水平对经典Wnt信号通路中的β-catenin、LRP6、Dkk1和Wnt4表达的调节作用影响了Wnt/β-catenin通路的传导从而促进了小鼠胚泡的附着过程。