【摘 要】
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本文主要研究通过在基因重组Escherichia coli BL 21发酵生产类人胶原蛋白Ⅱ的表达蛋白阶段添加丙酮酸来提高类人胶原蛋白Ⅱ的产量。并运用响应面优化法对丙酮酸添加过程中影
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本文主要研究通过在基因重组Escherichia coli BL 21发酵生产类人胶原蛋白Ⅱ的表达蛋白阶段添加丙酮酸来提高类人胶原蛋白Ⅱ的产量。并运用响应面优化法对丙酮酸添加过程中影响类人胶原蛋白Ⅱ的产量的因素(丙酮酸的添加量、丙酮酸的添加时间和磷酸缓冲液浓度)进行了摇瓶实验优化。最终,在磷酸缓冲液浓度是0.17mol/L的发酵培养基中,在诱导时添加8.23mmol/L的丙酮酸得到类人胶原蛋白Ⅱ的产量为0.29g/L,相对于对照实验组增长了11.54%,细胞的OD60¨0也比对照组提高了28.72%。在摇瓶实验数据的基础上,用发酵罐实验对丙酮酸的添加量、丙酮酸的添加时间这两因素对类人胶原蛋白Ⅱ的产量的影响作了研究。结果显示：能显著提高类人胶原蛋白Ⅱ的产量的丙酮酸的添加量为15.84mmol/L,丙酮酸的添加时间为诱导后1小时。在此条件下,细胞干重和蛋白产量分别达到69.6g/L和11.87g/L。
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