CGA-N46是一种小分子短肽，具有较高的抗白假丝酵母活性，有望成为抗真菌药物。基因工程表达是制备CGA-N46的一种常用方法，但存在表达量低、难以纯化等问题。本文以构建好的枯草芽孢杆菌工程菌DB1342(p-3N46)为实验菌株，优化影响CGA-N46表达的因素和条件，并研究CGA-N46的纯化工艺。采用单因素实验筛选出了基础培养基2×MSR、最佳碳源糊精和最佳氮源蛋白胨；利用部分因素实验设计筛选出影响多肽表达的显著影响因子碳源和氮源，并确定了非显著影响因子的取值。最陡爬坡实验和中心组合实验得到了显著影响因子碳源最佳用量和氮源最佳用量。最终，使CGA-N46高效表达的培养基和发酵条件为：糊精16.6g/L、蛋白胨19.2g/L、酵母粉50g/L、K2HPO4·3H2O6g/L、培养基初始pH6.5、接种量5%、诱导时机1h、发酵时间56h、发酵温度30℃。在最佳发酵条件下表达CGA-N46，目的多肽表达量比优化前提高了4.21倍。将离心获得的发酵上清应用硫酸铵分步盐析法分离CGA-N46，CGA-N46在硫酸铵70%饱和度条件下沉淀下来；采用硅胶吸附层析和分子筛层析进一步纯化得到了纯度为58.2%的CGA-N46样品。采用液体培养法验证了CGA-N46的抑菌活性，表明CGA-N46具有抑制白假丝酵母生长的活性。