【摘 要】
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研究背景和目的运用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)和蛋白质芯片技术检测肝细胞癌患者和正常人血清蛋白质指纹图谱表达差异,筛选肝细胞癌特征性血清标志
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研究背景和目的运用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)和蛋白质芯片技术检测肝细胞癌患者和正常人血清蛋白质指纹图谱表达差异,筛选肝细胞癌特征性血清标志物。为肝癌的临床诊断和治疗提供可靠的、准确灵敏的实验室参考指标。本研究中筛选出来的CCL15将在肝癌侵袭和转移中发挥重要作用。研究方法第一部分应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)和蛋白质芯片技术检测肝细胞癌患者和正常人血清蛋白质指纹图谱表达差异,筛选肝细胞癌特征性血清标志物。第二部分针对肝癌患者血清高表达的7777.27Da蛋白质进行分离和质谱鉴定,确定为CCL15;后续通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法对肝癌患者血清中CCL15加以证实;也通过免疫组化法证实肝癌组织中高表达CCL15第三部分通过一系列细胞学实验在体外证实了 CCL15-CCR1轴在肝癌侵袭和转移中的作用。研究结果1.我们利用SELDI-TOF-MS筛选到了 7个差异蛋白质,其中我们发现质荷比为6489.48Da(P1)、6662.34Da(P2)、8593.75 Da(P4)、8720.23 Da(P5)处的四个差异蛋白质含量在正常人组明显高于良性疾病组和肝癌组,质荷比为7777.27Da(P3)和9250.00Da(P6)处的两个差异蛋白质在肝细胞癌组明显高于良性疾病组和正常人组,质荷比为16200.17Da(P7)处的差异蛋白质含量在良性疾病组明显高于肝细胞癌组和正常人组。2.其中7777.27Da蛋白质鉴定为CCL15。3.CCL15-CCR1轴能够促进肝癌的侵袭和转移。结论1.血清中高表达的CCL15有可能成为肝癌诊断的重要标志物。2.CCL15-CCR1与肝癌的侵袭和转移密切相关,CCL15-CCR1有可能成为抑制肝癌转移和复发的药物靶点。
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