鸡血藤（Spatholobi Caulis）是豆科植物密花豆（Spatholobus suberectus Dunn）的干燥藤茎的干燥藤茎,是传统中药材,具有活血化瘀、调经止痛的作用。本研究对鸡血藤总黄酮提取工艺优化并对总黄酮成分进行分析鉴定,基于总黄酮含量及浸出物成分对鸡血藤药材进行质量评价,并利用DNA条形码对鸡血藤及其混伪品进行分子鉴定,主要研究结果如下:（1）使用超声法在单因素试验基础上,通过正交试验优化鸡血藤总黄酮化合物的提取工艺。各因素对鸡血藤总黄酮提取率影响大小顺序依次为提取溶剂＞超声功率＞提取时间＞过筛目数。最佳提取工艺条件为:鸡血藤粉末过100目筛,加入50%乙醇,超声功率300 W,提取时间1.5小时。在最佳工艺条件下,鸡血藤的总黄酮提取率为29.54%,利用UPLC-Q-TOF/MS方法鉴定出鸡血藤总黄酮类化合物共61种化学成分。优化后的鸡血藤总黄酮提取率高,验证试验结果表明该工艺稳定可行,为鸡血藤总黄酮研究奠定了理论基础。（2）为研究鸡血藤质量评价,对鸡血藤水分、灰分,浸出物等含量进行测定。17批样品中有5批棕色、9批深棕色、3批浅棕色。鸡血藤横切面含树脂的偏心性环纹数为1～9圈,直径为2～12cm。鸡血藤成分含量分析结果显示。鸡血藤饮片水分含量在4.89%～11.22%之间,全部低于13%;总灰分含量在1.57%～3.68%之间,全部低于4%;浸出物含量在10.93%～24.34%之间,全部高于8%;总黄酮含量在12.46%～32.84%之间,药典中暂无相关规定。不同环和不同直径的鸡血藤测定结果表明,总黄酮含量与鸡血藤树脂环纹数、直径增加呈正相关,其醇溶性浸出物含量和鸡血藤脂环纹数、直径无相关性。鸡血藤木质部和韧皮部的浸出物及总黄酮测定结果表明,木质部总黄酮略高于韧皮部,但浸出物含量低于韧皮部。鸡血藤鲜样质量评价结果显示,3、4、35年生鸡血藤侧枝藤浸出物含量均低于8%,总黄酮均低于6%。鸡血藤侧枝藤茎可溶性蛋白及可溶性糖两种成分在2～3年样品中较低,3～35年样品中较高。综合评价,鸡血藤饮片药材质量评价结果显示17批样品全部达到鸡血藤入药标准。（3）基于ITS2序列对鸡血藤及其混伪品进行分子鉴定。鸡血藤及其混伪品的ITS2序列特征显示,鸡血藤ITS2序列长度207 bp,平均G+C含量70.13%,常春油麻藤平均G+C含量为68.98%,与鸡血藤相似度较高。滇鸡血藤、香花崖豆藤、大血藤、黑老虎、网络网络崖豆藤的平均G+C含量分别为59.83、56.89、67.77、61.47、65.22%,与鸡血藤ITS2序列相似度较低。分析其他混伪品与鸡血藤的保守序列结果显示差异性显著,表明保守序列可鉴别鸡血藤和它的混伪品。鸡血藤及其混伪品的ITS2的二级结构均为典型的“一个环四个螺旋区臂”结构,但臂I、臂Ⅱ、臂Ⅲ的内环数量及大小存在显著差异。鸡血藤、滇鸡血藤、黑老虎在臂Ⅳ上无凸环,香花崖豆藤、大血藤、常春油麻藤、网络崖豆藤在臂Ⅳ上有凸环,且大血藤凸环较大。鸡血藤及其混伪品的ITS2二级结构保守环具有显著差异,说明可基于ITS2序列二级结构图鉴别鸡血藤及其混伪品。进化分析结果显示,鸡血藤和它的混伪品ITS2序列最小种间距离为0.340,远大于鸡血藤种内的最大距离0.025,存在明显隔阂。UPGMA系统发育树结果显示,来自不同地区的同一物种鸡血藤6批样品ITS2序列聚成一类,常春、网络、香花崖豆藤距离鸡血藤较近,与鸡血藤聚为一大支,其中香花和网络单独聚为一小支。大血藤、黑老虎、滇鸡血藤聚为一支,与鸡血藤差异较大。丁公藤为单独一支。以上结果表明,ITS2序列可用于鉴别鸡血藤及其混伪品。综上所述,通过本研究建立了鸡血藤质量评价体系并基于ITS2的分子鉴别方法能够辨析其混伪品,为评价鸡血藤质量优良和鉴别其混伪品提供理论基础。