【摘 要】
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目的:血栓性疾病已成为全球性的健康威胁,其发病率高、死亡率高、致残率高,给社会造成了巨大的健康及经济负担。目前临床常用的抗凝、抗血小板及溶栓药物,在血栓性疾病的防治中起到了重要的作用,但普遍存在治疗窗窄、全身出血风险高等问题。因此,开发新的靶向抗血栓药物迫在眉睫。本研究构建了一种基于血小板膜/红细胞膜的仿生纳米系统(PM/RM@PLGA@P/R)来递送人参皂苷Rg1以及全氟己烷(PFH)。该系统将
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目的:血栓性疾病已成为全球性的健康威胁,其发病率高、死亡率高、致残率高,给社会造成了巨大的健康及经济负担。目前临床常用的抗凝、抗血小板及溶栓药物,在血栓性疾病的防治中起到了重要的作用,但普遍存在治疗窗窄、全身出血风险高等问题。因此,开发新的靶向抗血栓药物迫在眉睫。本研究构建了一种基于血小板膜/红细胞膜的仿生纳米系统(PM/RM@PLGA@P/R)来递送人参皂苷Rg1以及全氟己烷(PFH)。该系统将PFH的超声响应性溶栓作用与人参皂苷Rg1的抗氧化、抗炎等活性融为一体,借助血小板膜趋向血栓部位的特性以及红细胞膜的免疫逃逸作用,最终实现多功能靶向抗血栓治疗。方法:首先通过共挤出法制备得到PM/RM@PLGA@P/R纳米系统;根据粒径、电势等参数对纳米的制备方法进行优化;并对纳米药物的形貌、体外释放及抗氧化能力等理化性质进行表征。采用MTT及溶血实验等考察纳米的体外生物安全性;利用共聚焦显微镜检测不同细胞(HUVEC、HELF和RAW264.7)对PM/RM@PLGA@P/R的摄取能力;测定细胞内ROS含量来判断纳米药物的抗氧化能力;通过考察纳米的凝血指数评价纳米的体外抗凝作用;并制备血凝块测定药物的体外溶栓能力。最后,建立小鼠尾部血栓模型研究PM/RM@PLGA@P/R的体内抗血栓作用及生物安全性。结果:PM/RM@PLGA@P/R呈现“核-壳”结构,粒径均一(~100 nm),表面的细胞膜蛋白保留完整,具有超声响应性释放特性,在体外能够高效地清除自由基。溶血及MTT实验表明,药物具有良好的生物相容性;相比于PLGA@P/R,PM/RM@PLGA@P/R能够更好地靶向血管内皮细胞,逃避巨噬细胞的清除;该纳米还能够有效地抑制氧化损伤的细胞生成ROS,具有较好的体外抗凝血及溶栓作用。动物实验结果表明,PM/RM@PLGA@P/R与低聚焦超声治疗联合应用对血栓抑制率高达88.20%,展现出良好的治疗效果,且具有良好的生物安全性。结论:本研究构建了一种双重靶向的多功能仿生纳米药物(PM/RM@PLGA@P/R)用于血栓性疾病的治疗。该纳米系统具有优异的靶向性、免疫逃逸作用,达成了对人参皂苷Rg1以及PFH高效精准递送的目标,实现了抗氧化、抗炎、抗凝血与物理溶栓的联合治疗,为研发高效、安全的抗血栓药物提供了新方法。
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