目的 (1) 简化、改进睾丸支持细胞(Sertoli cell)的分离方法,减少分离细胞的制作成本、提高细胞的纯度。(2)改良制作大鼠原位肝移植模型的方法,减少术后并发症的发生,提高生存率;建立稳定的肝移植急性排斥模型。(3)通过不同途径行Sertoli细胞—肝脏联合移植,探讨Sertoli细胞是否可为移植肝提供免疫保护。 方法(1)Sertoli细胞分离中省去以剪刀剪碎、DNAS消化、39℃下培养等程序,以200目网过滤,2步消化后直接进入37℃培养。(2)采用“二袖套管法”,通过建立Wistar→Wistar或SD→SD大鼠肝移植模型熟练建立大鼠肝移植模型的技能,对术前用药、麻醉、术中操作等细节加以改进。对照研究Wistar→SD、SD→Wistar、Wistar→Wistar配对组合的肝移植术后排斥反应,选取排斥反应强烈、稳定的组合建立排斥反应模型。(3)以肝移植急性排斥模型Wistar→SD不干预组(A组n=14)为对照组,通过三种途径进行Sertoli细胞—肝脏联合移植,分别为:受体术后腹腔注射组(B组n=14)、阴茎背静脉注射组(C组n=14)及供体移植前门静脉注射组(D组n=14)。分别观察术后各组症状、体征、肝功能变化、移植肝病理特征等的变化。(4)供体门静脉注射Sertoli细胞,为使细胞在