IFN-γ对结肠癌细胞表达IL-33的影响

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目的探讨常氧和缺氧两种不同条件下IFN-γ对结肠癌CT26细胞表达IL-33的影响。方法首先,在常氧条件下使用IFN-y、IFN-γ联合PKA抑制剂H89处理CT26细胞,同时设置阴性对照组(NC),qRT-PCR检测CT26细胞中PKA、CREB和IL-33 mRNA表达;western blot检测CT26细胞中PKA、CREB、p-CREB和IL-33蛋白表达;免疫荧光共聚焦实验检测CREB蛋白在CT26细胞中的定位。之后,在缺氧条件下使用IFN-γ处理CT26细胞,同时设置阴性对照组(NC),乳酸实验检测CT26细胞生成乳酸的情况;qRT-PCR 检测 CT26 细胞中 PKA、CREB 和 IL-33 mRNA 表达;western blot检测CT26细胞中PKA、CREB、p-CREB和IL-33蛋白表达。结果IFN-y处理组细胞中PKA、CREB和IL-33 mRNA相对表达量分别为2.5土0.11、3.1±0.08 和 2.8±0.22,均明显高于 NC 组(P均<0.05);IFN-y 联合 H89处理组 PKA、CREB 和 IL-33 mRNA 相对表达量分别为 0.2±0.02、0.6±0.05 和 0.4±0.04,均明显低于NC组和IFN-y处理组,差异有统计学意义(P均<0.05)。western blot检测PKA、CREB、IL-33蛋白表达与mRNA表达结果一致。免疫荧光共聚焦检测显示IFN-γ组CREB表达较NC组增加,IFN-γ+H89组与IFN-γ组相比CREB表达减少。而在缺氧条件下,乳酸检测实验显示各组乳酸生成量具有差异(P<0.05);IFN-y处理组细胞中PKA和IL-33 mRNA相对表达量分别为0.6±0.24和0.4±0.18,均明显低于NC组,差异有统计学意义(P均<0.05);western blot检测PKA、CREB、IL-33蛋白表达在缺氧条件下较常氧条件下升高。结论在常氧和缺氧两种不同条件下,IFN-γ可能通过PKA-CREB通路对结肠癌CT26细胞表达IL-33产生影响。
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