睾丸支持细胞作为雄性生殖系统中唯一的体细胞，能分泌多种活性因子和营养物质，以促进和滋养其他细胞。本论文对小鼠睾丸支持细胞(sertoli cells，SCs)的体外生长特性以及规模培养进行了探索，并对支持细胞的生物学功能进行了初步研究。 首先对传统的小鼠睾丸支持细胞分离方法进行了改进，采用苏木精-伊红和Fas-L免疫组化染色对分离得到的细胞进行了鉴定。在传统的二维状态下进行培养，发现支持细胞的贴壁时间主要集中在接种后2-4h；当培养液中氨根离子浓度高于2.3 mmol/l，渗透压高于326mosm/kg，pH≤6.8时，支持细胞进入衰亡期；在氨基酸代谢方面，发现培养过程中丙氨酸和谷氨酸浓度迅速增加，缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸浓度略有降低，丝氨酸、精氨酸和甘氨酸浓度基本保持不变。 将原代分离的小鼠大脑皮质细胞(neuron stem cell，NSC)单独培养(对照组)或与小鼠SCs共培养(SCs组，SCs呈片状贴壁生长)或与微囊化SCs共培养(微囊组，SCs呈球状立体生长)以研究共培养的SCs和微囊化SCs对NSC增殖的影响，并用二维电泳的方法初步分析了支持细胞的胞外分泌产物。研究结果表明，SCs组于3d出现神经球，微囊组于6d出现大量典型的神经球。两组神经球的数量处于不断的变化中，总的趋势是逐渐减少(P<0.05)，微囊组能在较长时间内(30 d以上)维持神经球的数量和未分化状态。电泳显示支持细胞分泌大量的酸性蛋白质，初步判断可能含有大量的各种神经生长因子。 运用微载体技术对原代支持细胞进行了体外大规模扩增，并从转速、补料工艺、细胞接种密度和微载体密度等方面对培养工艺进行了优化。经过6d培养，细胞的最大密度达到4.6×106 cells/ml，远远大于静态培养所达到的最大密度4.8×105 cells/ml。试验结果表明，最佳培养工艺为细胞接种密度1.0×105 cells/ml，微载体密度3 mg/ml，搅拌转速30rpm。