蕲艾内生菌HCH285的卷线孢菌素活性及安全性研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wh104311
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本课题从蕲春蕲艾(Artemisia argyi)根茎部分离纯化得到一株内生真菌命名为HCH285,之后进行菌种鉴定、bostrycin方法学构建,同时对该HCH285内生菌代谢产物和bostrycin进行安全性和活性分析,主要结果如下:1.HCH285菌种鉴定。利用微生物学与分子生物学两种方法对HCH285内生真菌进行鉴定。微生物形态学观察发现菌落呈圆形,生长初期为白色绒状毛且生长蓬松,后期逐渐成红色且菌落背面的红色产物也清晰可见。HCH285菌丝体为无色有隔菌丝。它产单个、球形或椭圆形、黑色光滑的分生孢子。此外通过分子生物学技术对其ITS序列测定确定该菌株属于黑孢霉属球黑孢霉菌(Nigrospora oryzae)。2.HCH285内生菌产bostrycin分离制备方法建立。利用多种化学试剂对HCH285内生菌代谢产物提取,确定乙酸乙酯为最佳萃取试剂,以半制备液相进行化合物分离,优化卷线孢菌素bostrycin的HPLC制备方法,使用高效分析型液相检测分离纯度,其分离制备方法为:柱温:30℃,进样体积:700μL,流速:3 mL/min,流动相比例:甲醇:0.3%甲酸=50:50(v/v),检测时间:30 min,紫外检测:302 nm;采用400MHZ核磁共振波谱仪进行结构鉴定确定为卷线孢菌素bostrycin。3.Bostrycin活性分析。Bostrycin抗氧化活性分析证明,对三种自由基抗性顺序由大到小为O2>DPPH>OH。它的抗菌活性表明有较好的抗菌作用,对革兰氏阳性菌比革兰氏阴性菌较好。CCK-8法体外抗癌活性研究表明对U251,B10F16癌细胞的半致死浓度分别为4.30μM和6.05μM。4.Bostrycin及HCH285菌代谢色素的安全性分析。引入秀丽隐杆线虫(C. elegans)为生测材料,以食品级红曲红色素为对照,研究对C.elegans各生理指标的影响。试验表明HCH285菌产色素对C.elegans的急性与慢性毒性、摄食与运动能力、生长发育状态、卵块孵化率,均没有明显抑制作用且与食品级红曲红色素作用效果一致,综合各指标显示500μg/mL内为安全剂量。以相同方法和指标,分析bostrycin对C.elegans作用,确定剂量在10μg/mL内无毒副作用。
其他文献
新时期以来,随着经济全球化不断推进和我国特色社会主义市场经济的快速发展,我国农业发展取得举世瞩目成就的同时,也迎来了新的挑战。耕地面积锐减、自然灾害频发、农民文化素质较低、农业科技含量较低、农村管理不力和农民收入较低等因素都制约着我国的农业发展进程。总体生活水平的提高、人口的不断增长、人口结构性老龄化和人们食品安全的意识不断提升都要求我国农业由传统农业向现代新型农业转型。设施农业作为现代农业发展的
目的:探讨年轻2型糖尿病患者C反应蛋白水平与动脉粥样硬化的关系。方法:选择30~50岁2型糖尿病患者50例,采用彩色多普勒显像仪测量双侧颈动脉内膜中层厚度(IMT),根据IMT分为有血管病
近年来,全社会对收入分配制度改革的期待日渐强烈,完善个人所得税相关法律法规受到社会广泛关注,个税改革的呼声不断高涨。2019年1月1日新税法正式实施后,个税改革迈上新台阶