Pygopus（Pygo）是近年来发现的Wnt信号通路的新组分。在哺乳动物中Pygo有两个同源基因:Pygo1和Pygo2,后者的分布较为广泛。PYGO2蛋白定位于细胞核内,它有两个结构域,分别是位于C-端的PHD锌指结构域和位于N-端的NHD结构域。PYGO2通过PHD结构域与BCL9和β-catenin构成复合体,共同促进转录因子TCF对Wnt靶基因的转录激活。Pygo2 NHD结构域的功能尚不明确,有研究者认为它具有转录激活作用。近期研究显示,在哺乳动物中Pygo2可能还介导Wnt非依赖性的信号转导。串联亲和纯化技术（TAP）是在目的蛋白一端导入两个特异性的蛋白标签,经过两步亲和纯化,获得在生理条件下与目的蛋白相互作用的蛋白质,随后用质谱技术进行鉴定。它集合了亲和纯化和免疫共沉淀两种技术的优点,可以获得高纯度、高浓度的目的蛋白复合物,简便快捷。本研究利用串联亲和纯化和质谱联用的方法,从稳定表达外源性PYGO2蛋白（带ProtA和CBP标签）的DLD-1结肠癌细胞中,分离得到两个与PYGO2相互作用的新蛋白:MED12（Mediator of RNA polymeraseⅡtranscription subunit 12）和PIK3C2A（Phosphatidylinositol-4-phosphate 3-kinase C2 domain-containing alphapolypeptide）。进一步的免疫共沉淀实验证实,PYGO2通过NHD结构域与MED12结合。随后的荧光素酶实验显示,MED12过表达或用SiRNA阻遏MED12蛋白表达,对Pygo2 NHD结构域的转录激活活性均无明显影响;而当用siRNA阻遏MED12蛋白表达时,Pygo2 PHD结构域的转录激活活性显著增强,这暗示MED12可能会阻抑PHD结构域的转录激活活性,而这种活性很可能与染色质重塑有关。