【摘 要】
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目的探明黄花油点草乙酸乙酯部位的物质基础与活血作用,为该药材活血化瘀功效的开发应用提供实验依据。方法首先采用天然产物化学分离方法（半制备高效液相色谱、硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析等）对黄花油点草中乙酸乙酯萃取部位进行分离、纯化,再利用现代光谱分析技术对化合物结构进行鉴定;其次,对这些物质进行初步活性研究,通过DPPH和ABTS两种自由基清除实验,对黄花油点草乙酸乙酯部位分离所得单体化合物进行抗氧化
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目的探明黄花油点草乙酸乙酯部位的物质基础与活血作用,为该药材活血化瘀功效的开发应用提供实验依据。方法首先采用天然产物化学分离方法（半制备高效液相色谱、硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析等）对黄花油点草中乙酸乙酯萃取部位进行分离、纯化,再利用现代光谱分析技术对化合物结构进行鉴定;其次,对这些物质进行初步活性研究,通过DPPH和ABTS两种自由基清除实验,对黄花油点草乙酸乙酯部位分离所得单体化合物进行抗氧化能力测定;再以人脐静脉内皮细胞为研究对象,采用脂多糖诱导炎症模型,对单体化合物的抗炎能力进行评价;继而对血管体外生存环境进行模拟,给予不同血管活性物质刺激SD大鼠肠系膜血管环进行血管舒缩功能检测,利用血管张力检测系统记录血管张力变化,评价各单体化合物舒张或抑制收缩血管的作用;最后,综合三项活性实验的评价结果,选择活性最显著的化合物进行动物体内实验,此实验采用三氯化铁诱导SD大鼠颈动脉形成血栓为模型。以血栓重量和血栓形成率为指标,评价黄花油点草中活性成分抑制血栓形成的作用效果。结果1.从黄花油点草乙酸乙酯部位分离并鉴定出1个新型高分子量的苯丙素类化合物trimacoside A（1）,以及R-（-）-3-羟基-β-紫罗兰酮（2）、对羟基苯甲酸甲酯（3）、balanophonin B（4）、梣皮树脂醇（5）、（S）-5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentylfuran-2（5H）-one（6）、丁香树脂醇（7）、松脂素（8）、neoechinulin A（9）、白茅烯（10）、榕醛（11）共十个已知化合物;除化合物8外,其余化合物均为首次从黄花油点草中分离得到;2.抗氧化能力测定结果显示化合物7、8、10具有显著的清除自由基能力;化合物2、5、8、9和10对炎症细胞均具有保护作用,其中化合物2和9对炎症模型的保护作用最为显著（p<0.05）;筛选出能够抑制PE收缩血管作用的化合物为:1、2、6和10,其中化合物2能使血管收缩率由90.15%±10.70%降至23.10%±5.03%（p<（15）（13）（15）（20））;能够抑制KCl收缩血管作用的化合物为:2、3和8,其中化合物8能使血管收缩率由93.06%±12.50%降至49.39%±9.46%（p<0.05）;能够产生舒张血管作用的化合物为:4、5、7和8,这四个化合物均为苯丙素类化合物,其中化合物7、8的扩张血管作用较其余化合物更为显著。3.综合体外活性筛选结果,选取化合物8进行血栓形成抑制实验。最终结果显示化合物8能使血栓重量由空白对照组的2.30±0.05 mg降至1.70±0.03 mg,血栓形成抑制率可达到76.92%±3.9%（p<0.001）。结论发现黄花油点草乙酸乙酯萃取部位的物质基础主要为苯丙素类化合物;综合活性实验结果发现化合物8（松脂素）的抗氧化能力与舒张血管作用较其他化合物更为显著;大鼠颈动脉血栓形成抑制实验结果发现化合物8血栓形成抑制率较高,提示该化合物可用于预防或治疗血瘀证。本研究从抗氧化、抗炎、血管内皮功能活性检测、抑制血栓形成等多个角度进行药效学评价,合理可行,做到了方法科学,结果可信,为黄花油点草后续活血作用的开发提供了实验依据。
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