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目的:研究内质网应激在慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoixa,CIH)诱导大鼠肝损伤中的作用方法:将18只雄性SD大鼠(280-300g)随机等分为3组,即空白对照组(NC组)、慢性间歇低氧组(CIH组)、慢性间歇低氧+N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)干预组(CIHN组)。CIHN组的大鼠每天低氧开始前半小时给予新鲜的NAC溶液灌胃(1g/kg)。每天上午9点至下午5点之间,CIH与CIHN组大鼠接受间歇低氧处理,NC组大鼠接受相同频率的脉冲空气处理。8周后所有动物禁食12h,用10%水合氯醛(300mg/kg)对大鼠进行腹腔麻醉后心尖部采血、离心-80°C冻存备用。生理盐水心脏灌流后取出肝组织-80°C冻存备用。全自动生化分析仪测定血清生化指标;TBA法测定肝脏MDA含量;羟胺法测定肝脏T-SOD活性;分光光度法测定肝脏GSH含量;Western blot方法检测蛋白GRP78、p-PERK、p-IRE1、ATF6、CHOP、Caspase12表达水平;RT-qPCR法检测GRP78 mRNA表达水平;HE染色观察肝脏病理变化;免疫组织化学染色观察肝脏GRP78、CHOP、Caspase12表达水平。TUNEL/DAPI双染检测肝细胞凋亡;结果:1.与NC组相比,CIH组肝脏MDA含量明显增加(P<0.01),T-SOD活性明显降低(P<0.01)和GSH含量明显减少(P<0.01);与CIH组相比,NAC干预可抑制MDA含量增加(p<0.01),T-SOD活性的降低(p<0.01)和GSH含量的减少(p<0.01)。统计分析显示,NAC干预可完全抑制MDA含量的增加,部分抑制T-SOD活性的降低和GSH含量的减少。2.与NC组相比,CIH组血清ALT及AST含量明显增加(p<0.01;p<0.05),TC含量明显降低(p<0.05);与CIH组相比,NAC干预可抑制ALT及AST含量增加(p<0.01;p<0.05),而对TC含量的降低没有明显抑制作用(p>0.05)。统计分析显示,NAC干预只是部分抑制ALT及AST含量的变化。3.Western bolt检测蛋白变化显示,与NC组相比,CIH组肝脏GRP78、p-PERK、p-IRE1、CHOP及Caspase12蛋白表达明显上调,而活化的ATF6蛋白表达明显下调;与CIH组相比,NAC干预可显著抑制GRP78、p-PERK、p-IRE1、CHOP和Caspase12蛋白表达的上调,而对活化的ATF6表达的下调没有明显抑制作用。4.Real-time QPCR检测mRNA变化显示,与NC组相比,CIH组肝脏GRP78mRNA表达明显上调(p<0.01);与CIH组相比,NAC干预可显著抑制GRP78mRNA表达的上调(p<0.05)。统计分析显示,NAC干预只是部分抑制GRP78mRNA含量的变化。5.ELISA检测血清GRP78蛋白含量显示,与NC组相比,CIH组血清GRP78含量明显增高(p<0.01);与CIH组相比,NAC干预可显著升高血清中GRP78蛋白的含量(p<0.01)。6.肝脏组织切片HE染色可见,NC组肝组织结构大致正常。CIH组肝小叶区细胞明显水肿,包浆稀疏;汇管区大量慢性淋巴细胞浸润。与CIH组相比,NAC干预明显减轻肝细胞水肿及炎症。7.免疫组织化学染色显示,GRP78与Caspase12主要在细胞浆表达,CHOP主要在细胞质表达。与NC组相比,CIH组肝脏GRP78、CHOP与Caspase12表达明显上调,褐色面积明显增大,褐色明显加深;与CIH组相比,NAC干预可显著抑制GRP78、CHOP与Caspase12表达的上调,明显缩小褐色面积。评分显示,与NC组相比,CIH组GRP78、CHOP与Caspase12阳性计分均明显增高(p<0.01;p<0.01;p<0.01);与CIH组相比,NAC干预显著降低了评分(p<0.01;p<0.05;p<0.05)。统计分析显示,NAC干预部分抑制了GRP78与Caspase12蛋白表达的上调,完全抑制了CHOP蛋白表达的上调。8.TUNEL/DAPI双标荧光染色结果显示,与NC组比较,CIH组肝细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)显著增高(p<0.01),而NAC干预可以明显减轻凋亡现象(p<0.01)。此外,相关性分析发现,肝细胞凋亡指数与GRP78 mRNA表达呈正相关关系(P<0.01)。结论:慢性间歇低氧诱导的肝损伤可能是由于增多的活性氧簇激活了内质网应激相关凋亡信号通路,进而诱导了肝细胞凋亡;NAC可通过清除活性氧簇而减轻内质网应激,从而减轻肝细胞凋亡,改善肝功能。