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喹诺酮类药物(Quinolones,QNs)具有抗菌谱广、杀菌能力强、不良反应少等优点,在兽医临床上被广泛用于动物疾病的预防与治疗。但随着药物使用量的增加,不合理使用现象也越来越严重,导致药物在动物体内蓄积,进而危害人类健康。因此,必须对动物源性食品中此类药物残留进行严格的监控。本研究建立了分子印迹固相萃取(MISPE)-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测鸡肉中23种喹诺酮类药物多残留的分析方法。1.对同时测定23种喹诺酮类药物的UPLC-MS/MS分析条件进行了优化。对质谱电离方式、定量离子、定性离子、锥孔电压、碰撞能量、母离子、子离子等质谱条件和流动相组分与比例、梯度洗脱条件等色谱条件分别进行了优化。确定以0.1%(v/v)甲酸水-乙腈为流动相,采用BEH C18色谱柱分离,梯度洗脱,采用电喷雾正离子多反应监测模式,外标法定量。2.对MISPE柱净化23种喹诺酮类药物的上样液体积、淋洗、洗脱溶液的选择及洗脱液的体积进行优化,最后确定上样液的体积为4 mL,水、乙腈、2%(v/v)乙酸乙腈、0.1%(v/v)氨水各2 mL为淋洗条件,5%(v/v)氨化甲醇3 mL为洗脱条件。将鸡肉样品经均质处理后,采用磷酸盐缓冲液提取,提取液经MISPE柱上样,依次用水、乙腈、2%(v/v)乙酸乙腈、0.1%(v/v)氨水淋洗,5%(v/v)氨化甲醇洗脱,氮气吹干,0.1%(v/v)甲酸水-乙腈(9:1,v/v)复溶。考察了MISPE柱对23种喹诺酮类药物的特异性吸附特性;MISPE柱最大柱容量范围为470.6~898.3μg/L;考察了MISPE柱重复使用性,MISPE柱至少可以重复使用11次,回收率均达到75%以上,各药物的变异系数在1.5%~14.9%之间。3.系统评价了同时测定鸡肉中23种喹诺酮类药物的MISPE-UPLC-MS/MS方法的线性关系、检出限、定量限、准确度、精密度、基质效应、灵敏度等的考核指标。实验得出,各药物在添加浓度在0.25~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99;检出限(LOD)和定量限(LOQ),分别为0.08μg/kg和0.25μg/kg;在0.25、2.5、5μg/L三个加标浓度下,各药物平均回收率为88.6%~103.3%,批间、批内RSD分别为0.7%~10.5%和0.6%~13.2%:基质对于各药物分析结果不影响;本方法灵敏度高、操作简单、快速。4.利用优化后的MISPE-UPLC-MS/MS分析方法对山东省某屠宰场采集的80份鸡肉样品进行检测,本方法测得的残留值与采用农业部GB/T 20366-2006方法检测方法得到的残留值基本一致。