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目的：研究不同级别胶质瘤组织以及胶质瘤细胞系中microRNA-134（miR-134）的表达，建立稳定表达miR-134的胶质瘤细胞株，研究miR-134过表达对胶质瘤细胞中Nanog的靶向抑制作用，并探索miR-134过表达对胶质瘤细胞体内外生物学活性的影响。为后续进一步研究Nanog相关通路的胶质瘤基因靶向治疗奠定基础。方法：①Real-time PCR方法检测11例正常脑组织（取自颅脑损伤行内减压术患者）、42例不同级别脑胶质瘤组织、人脑胶质瘤细胞系U87、U251中miR-134的表达情况。②通过慢病毒包装的miR-134表达载体转染U87胶质瘤细胞，利用筛选抗生素（灭瘟素，Blasticidin S）持续筛选，建立稳定表达miR-134的胶质瘤细胞株，并通过RT-PCR和Western blotting实验分别检测该细胞株中Nanog的mRNA和蛋白表达水平。③通过MTT、Transwell细胞迁移侵袭实验、细胞划痕、流式细胞术、透射电镜、裸鼠成瘤实验、免疫组织化学染色等方法检测miR-134靶向抑制Nanog后对胶质瘤细胞体内外生物学活性的影响。结果：①与正常脑组织相比，miR-134在不同级别胶质瘤中的表达均明显下降（均P＜0.05）。WHO Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中miR-134表达明显低于WHOⅠ～Ⅱ级（P＜0.05）。与正常脑组织相比，miR-134在胶质瘤细胞系U87、U251中的表达亦显著降低（均P＜0.05）。②通过使用杀稻瘟素（Bsd）持续筛选20天后，获得稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的细胞株，荧光显微镜下观察传代5次以上的转染细胞株可见所有细胞均稳定表达GFP荧光。Real-time PCR测得U87-miR-134组与空白对照组及空质粒组相比，miR-134水平显著提高，差异有统计学意义（P＜0.05），空质粒组和空白对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）。提示成功建立了稳转细胞株U87-miR-134组和空质粒组。进一步研究显示U87-miR-134细胞中Nanog的mRNA和蛋白表达水平显著下调（P＜0.05）。③与空白对照组及空质粒组相比，U87-miR-134胶质瘤细胞的增殖水平、侵袭和迁移能力均明显下调，细胞凋亡显著增加； U87-miR-134异位移植瘤的体积与质量都明显小于空白对照组和空质粒组细胞形成的肿瘤，提示裸鼠皮下成瘤能力亦明显下降（P＜0.05）。结论：①miR-134在胶质瘤中呈低表达。提示miR-134的表达下调可能与胶质瘤的发生发展关系密切。②成功建立了miR-134过表达胶质瘤细胞株，为后续进一步体内外研究miR-134相关靶基因与胶质瘤细胞生物学活性的关系奠定基础。③miR-134过表达可通过靶基因Nanog抑制胶质瘤细胞体内外生物学活性：U87-miR-134细胞的增殖能力、迁移和侵袭力均明显下调；并且细胞凋亡显著增加。