菠萝蜜果实糖代谢相关酶活性及其基因表达分析

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:yeshenshi1
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决定果实品质重要因素之一是果实中糖分含量以及组成种类,而影响果实糖分的代谢过程极其复杂,受多种酶共同调节。为了解菠萝蜜果实糖代谢过程的主要作用酶和基因,本研究分别以4份干苞种质(12E、13D、13K、148-4)和份湿苞种质(12As、12Cs、13Bs、13Ls)为实验材料,分析了菠萝蜜果实成熟过程中的糖分含量变化、糖代谢相关酶活性变化,并对相应的酶基因进行了表达分析,主要研究结果如下:1.可溶性糖含量。干、湿苞菠萝蜜果实成熟过程中,蔗糖是最主要的可溶性糖,其次是果糖和葡萄糖,不同种质间可溶性糖和蔗糖含量存在差异,除干苞种质13K和湿苞种质13Bs在果实成熟第IV阶段略微下降外,4种糖的含量在菠萝蜜果实成熟过程中均呈逐渐上升的趋势;果实未成熟时果糖与葡萄糖比值较低,完全成熟后该比值接近1:1。2.酸性转化酶。菠萝蜜果实成熟过程中的酸性转化酶活性变化在干、湿苞种质中有明显差异,干苞种质果实中的酸性转化酶活性相对稳定,且维持较低水平,湿苞种质果实中的酸性转化酶活性在果实成熟过程中显著上升,其中湿苞种质12Cs和13Bs果实中的酸性转化酶活性与果实中的果糖和葡萄糖含量间存在显著正相关;对1个酸性转化酶基因的表达分析表明,所有种质果实的成熟过程中,AhAI 1基因的表达水平均较低,可能对于调控果实中糖分积累的作用微弱。3.中性转化酶。菠萝蜜果实成熟过程中的中性转化酶活性变化幅度较小,且在干、湿苞种质间差异不大,中性转化酶活性与各糖分含量间均不存在显著相关关系,说明中性转化酶可能不是决定菠萝蜜果实内糖分积累的关键酶类。4个中性转化酶基因的表达分析结果显示,菠萝蜜果实成熟过程中,AhNI 1基因的表达水平最高;AhNI1与AhNI 2基因在果实未成熟阶段表达水平高,AhNI 3基因和AhNI 4基因在完熟果中的表达水平较高,表明菠萝蜜果实成熟过程中的中性转化酶活性可能同时受这4个基因家族成员的影响。4.蔗糖合成酶。菠萝蜜果实成熟过程中的蔗糖合成酶合成方向活性变化幅度不大,在多数种质中,果实未成熟期的酶活性较高;分解方向的酶活性始终维持较低水平,说明菠萝蜜果实成熟过程中,蔗糖合成酶主要催化果实内蔗糖的合成。3个蔗糖合成酶基因的表达分析结果显示,菠萝蜜果实成熟过程中,AhSS 1基因的表达水平最高,3个基因的表达水平变化相似,且与蔗糖合成方向的酶活性变化相似,3个基因家族成员可能共同调节菠萝蜜果实中的糖分代谢。5.蔗糖磷酸合成酶。在菠萝蜜果实成熟过程中,所有种质的蔗糖磷酸合成酶活性与蔗糖含量之间的相关系数均大于其与蔗糖合成酶合成方向的相关系数,尽管只在干苞种质13D果实中的蔗糖含量与SPS活性之间存在极显著正相关关系。4个蔗糖磷酸合成酶基因的表达分析结果显示,AhSPS 1基因的表达水平最高;多数种质果实中的AhSPS 1基因和AhSPS 2基因的表达水平变化相似,均在未成熟果中表达低;AhSPS 3基因和AhSPS 4基因的变化趋势相似,均在未成熟果中表达高。6.淀粉酶。1个ɑ-淀粉酶基因和4个β-淀粉酶基因的表达分析结果显示,菠萝蜜果实成熟过程中,多数种质果实中的AhAMYɑ1基因的表达水平呈逐渐上升的趋势,可能对调控果实内淀粉水解的作用更大;AhAMYb 6基因的表达水平显著高于其他3个基因,其变化模式与AhAMYɑ1极为相似,但与其余3个β-淀粉酶基因的表达变化模式不同,说明AhAMYb 6基因可能与AhAMYɑ1基因共同参与菠萝蜜果实成熟过程中的糖分代谢过程。
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