不同品种鸡下丘脑NPY、MC4R基因表达的研究

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目的研究蛋用型、肉蛋兼用型、肉用型鸡各阶段采食量、下丘脑采食量关键基因NPY、MC4R的表达,探索不同用途鸡下丘脑NPY、MC4R表达差异及与采食量间的关系,为鸡的育种和营养研究提供理论依据。方法本实验所用海兰褐壳蛋鸡、AA肉种鸡的雏鸡购自辽宁锦州当地商品孵化场,庄河大骨鸡雏鸡由庄河大骨鸡保种场有限公司提供。试验鸡自1日龄开始饲养,自由采食,饲粮按品种/品系营养需要设计,饲养条件按品种/品系商品生产条件控制。试验期间记录每周采食量,计算平均日采食量。分别在4、6、17周末随机抽取6羽海兰褐蛋鸡、大骨鸡、AA肉种鸡。经断颈宰杀后,立即采集下丘脑置液氮冻存。采用实时定量荧光PCR的方法检测鸡下丘脑NPY、MC4R mRNA的表达情况,Western blot方法检测鸡下丘脑NPY、MC4R的蛋白质的表达变化。结果各品种鸡各阶段采食量。从4、6、17周龄,3品种鸡体重、平均日采食量和每千克体重代谢能摄入量的差异结果来看,能量摄入量由高至低的顺序是海兰褐蛋鸡、大骨鸡、AA肉种鸡。同一周龄内,各品种鸡的采食量有差异,但总体变化趋势相同,即:随周龄增加,均呈下降趋势。鸡下丘脑NPY、MC4R的表达。随周龄增加,海兰褐蛋鸡下丘脑的NPY mRNA呈高—低-高变化,AA肉种鸡一直保持较高状态,大骨鸡为高—低-低变化,且同一周龄内,3品种鸡变化趋势不一致。不同品种鸡下丘脑NPY蛋白随周龄变化趋势有差异。海兰褐蛋鸡(P<0.01)和大骨鸡(P<0.05)随周龄增加均呈提高趋势,AA肉种鸡呈高、低、高趋势(P<0.01)。鸡下丘脑NPY蛋白与NPY mRNA间无显著相关(R=—0.421,P=0.259)。4周龄大骨鸡MC4R mRNA极显著低于6周龄和17周龄(P<0.01),海兰褐蛋鸡和AA肉种鸡的各时期均无显著差异(P>0.05)。鸡下丘脑MC4R蛋白与MC4R mRNA呈极显著负相关(r=-0.822,P=0.007),随周龄增加,3品种鸡下丘脑MC4R蛋白的变化规律不同。同一周龄内,3品种鸡下丘脑MC4R蛋白有差异。鸡代谢能摄入量与NPY、MC4R表达的关系。鸡单位体重的代谢能摄入量与下丘脑NPY蛋白、NPY蛋白/MC4R蛋白呈极显著负相关(NPY蛋白,r=-0.876,P=0.002;NPY蛋白/MC4R蛋白,r=-0.835,P=0.005)。用鸡下丘脑NPY蛋白估测每日千克体重代谢能摄入量数学模型为e^(0.837-0.003x)(r=0.859,P=0.0003267);用鸡下丘脑NPY蛋白/MC4R蛋白估测每日千克体重代谢能摄入量数学模型为e^(0.748-0.581x)(r=0.776,P=0.002)。结论1、3品种鸡能量沉积能力由高至低依次为AA肉种鸡、海兰褐蛋鸡和庄河大骨鸡。2、3品种鸡下丘脑的NPY mRNA变化趋势有一定差异,同一周龄也有差异。鸡下丘脑NPY蛋白与NPY mRNA无显著相关。NPY蛋白随周龄增加而提高。鸡每千克体重代谢能摄入量与其下丘脑NPY蛋白呈极显著负相关,可用于预测鸡每千克体重代谢能摄入量。下丘脑NPY蛋白参与采食量调控,可用于指示鸡的生长速度和饲料转化率,及饲料营养水平是否适宜。3、3品种鸡的MC4R基因表达规律不同。鸡下丘脑MC4R蛋白与MC4RmRNA呈极显著负相关,两者均与鸡的每千克体重代谢能摄入量无显著相关,而NPY蛋白与MC4R蛋白比值与鸡每千克体重代谢能摄入量极显著负相关。MC4R参与采食量调控,MC4R mRNA或MC4R蛋白与NPY蛋白一起,可用于指示鸡的摄食能力和饲粮营养水平。
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