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目的：研究趋化因子CCL20在喉鳞癌中的表达及其临床意义,分析CCL20基因启动子区的单核苷酸多态性位点及其临床意义,探索趋化因子CCL20对过表达CCR6的喉鳞癌细胞系的体内外生物学行为的影响。方法：收集70例行全喉切除术的喉鳞癌患者肿瘤组织、癌旁组织以及15例声带白斑组织(包括其中13例发生淋巴结转移喉鳞癌患者的转移淋巴结和10例无肿瘤转移的淋巴结的白片),应用免疫组化技术检测CCL20的表达,分析其与患者临床病理特征的关系；收取180例喉鳞癌患者,51例声带白斑,116例正常人的外周血,应用PCR和测序技术分析CCL20基因启动子区存在的SNP位点,分析其与喉鳞癌,声带白斑发病的联系,以及同患者临床病理特征的关系；收取36例喉癌患者和42名正常志愿者的外周血,应用ELISA技术检测喉鳞癌患者和正常人血清中CCL20蛋白的表达水平,分析其与患者临床病理特征及CCL20启动子区SNP位点的关系；应用慢病毒感染构建稳定表达CCR6的HEp-2-CCR6和HN-8-CCR6喉鳞癌细胞系,并用流式细胞术,细胞爬片免疫组化,钙流实验鉴定细胞系CCR6的表达及受体功能情况；应用构建的过表达CCR6喉鳞癌细胞系,通过CCK-8增殖实验,划痕实验,Transwell迁移和侵袭实验,以及裸鼠成瘤实验,研究CCL20对过表达CCR6的喉鳞癌细胞系的生物学功能。结果：所有癌旁正常组织和声带白斑组织,以及66例喉鳞癌组织中检测到CCL20表达,且表达水平逐渐升高,晚期肿瘤(T3+T4, Ⅲ+Ⅳ期)组织中CCL20的表达高于早期肿瘤(T1+T2,I+II期),发生淋巴结转移的患者,喉癌组织CCL20的表达高于未转移者,转移至淋巴结中的肿瘤细胞高表达CCL20；测序结果显示喉鳞癌患者,声带白斑患者和正常人CCL20基因的启动子区共检测到7种SNP位点,并分析发现其中5个SNP位点rs142242947 (-1401C>T)、rs140459563 (-1369C>T)、rs189913367 (-1298C>T)、rs62190018 (-962C>A)、rs6749704(-786T>C)均与喉鳞癌,声带白斑的发病在整体上无关,但rs62190018(-962C>A)携带A等位基因的研究对象发生晚期喉鳞癌(T3+T4)的风险显著降低,同时发现rs62190018 (-962C>A)基因型为AA或携带等位基因A的喉癌患者病情进展为晚期(T3+T4)的风险明显减小,对患者具有保护意义；rs6749704 (-786T>C)位点基因型一旦发生改变,患者发生淋巴结转移和进展为晚期喉癌(III+IV期)是风险显著增加；ELISA结果显示喉鳞癌患者外周血CCL20的表达水平较正常人显著降低,且发生淋巴结转移和晚期喉鳞癌患者CCL20的表达水平更低,而预后相对较好的声门型喉癌患者外周血CCL20水平显著高于声门上型喉癌；rs62190018(-962C>A)位点基因型突变为CA后,外周血CCL20的表达水平升高,rs6749704(-786T>C)位点的一旦发生突变,外周血CCL20的表达水平则显著降低；流式细胞术和细胞爬片免疫组化均证实利用慢病毒感染建立的CCR6过表达稳转喉鳞癌细胞系表面表达CCR6蛋白,且钙流实验证实其具有生理功能；一定浓度范围内,CCL20可增加过表达CCR6喉鳞癌细胞的迁移和侵袭能力,但对其增殖的影响不明显,且HEp-2-CCR6细胞系在裸鼠体内的成瘤能力低于对照组。结论：喉鳞癌患者肿瘤组织CCL20的高表达可能促进了喉鳞癌细胞的迁移和侵袭能力,参与了喉鳞癌的发展；SNP rs62190018 (-962C>A)基因型为AA或携带等位基因A对喉鳞癌患者具有保护意义,而rs6749704(-786T>C)一旦突变,将显著增加喉鳞癌患者发生淋巴结转移和病情进展的风险；外周血CCL20的表达水平与CCL20启动子区SNP不同的突变形式相关,其表达水平的下降可能参与了喉鳞癌发生和发展。