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目的：探讨转染吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)基因并获得高表达的小鼠骨髓来源成熟树突状细胞(Dendritic Cell, DC)及色氨酸代谢产物(Tryptophan Catabolites, TC),通过体内外相结合的方法,探讨其对T淋巴细胞增殖、凋亡的影响,为临床抑制器官移植排斥反应,成功诱导移植后免疫耐受开辟新途径。方法：(1)采用培养基细胞因子选择法体外培养小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪检测DC表面抗原CD80、CD86、MHCⅡ、CD11c的表达情况。(2)利用携带IDO基因的腺病毒感染小鼠成熟DC,倒置荧光显微镜下观察转染后DC中绿色荧光蛋白的表达,HPLC检测IDO的表达。(3)免疫磁珠法阳性分选同种异系小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞的阳性率。(4)在体外实验中,以同种异系(BALB/c)小鼠脾CD4+T淋巴细胞为反应细胞,分别以供体DC、DC+TC、IDO+DC和IDO+DC+TC为刺激细胞进行单向混合淋巴细胞培养。在体内实验中,分别以供体DC、TC、IDO+DC及IDO+DC+TC输注同种异系小鼠体内,5天后分别获取其脾CD4+T淋巴细胞为反应细胞,与供体DC行单向混合淋巴细胞培养。同时,在IDO+DC+TC注射组,分别以供体(C57BL/6) DC及第三系(C3H/He) DC为刺激细胞,行单向混合淋巴细胞培养。MTS法检测各组CD4+T淋巴细胞的增殖情况,Annexin-v及PI双染法分析其凋亡情况。使用SPSS18.0软件包进行数据分析。结果：(1)经体外培养,每只小鼠可获得5-6×106个具备典型树突状结构的骨髓来源DC,其中DC表面高表达CD80(97.5%±2.1)、CD86(92.0%±1.3)、MHC-Ⅱ (87.0%±1.6)、CDllc (89.1%±3.1)。(2)AD-ID0转染DC最佳MOI为300,转染效率为74.3%。HPLC检测IDO活性,即犬尿氨酸特异代谢率为61%。(3)免疫磁珠法可分选出纯度达96%以上的CD4+T细胞,用于单向混合淋巴细胞培养。(4)体内外实验中,IDO+DC及TC均能抑制同种异系CD4+T细胞增殖、诱导其凋亡(P<0.01),而IDO+DC+TC较前两者对CD4+T细胞作用更强(P<0.01)。在注射IDO+DC+TC组,供体DC组较第三系DC组显著抑制CD4+T细胞增殖,诱导其凋亡(P<0.01)。结论：高表达IDO的DC联合TC抑制同种异系小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞增殖、诱导其凋亡能力较单一因素作用时更为显著,并可能诱导针对供体抗原的特异性免疫抑制。