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第一部分三氧化二砷诱导骨髓增生异常综合征SKM-1细胞凋亡及其作用机制研究目的:探讨三氧化二砷（AS2O3）诱导骨髓增生异常综合征（MDS）SKM-1细胞凋亡及其作用机制。方法:将不同浓度AS2O3与SKM-1细胞共育24小时与48小时,采用光学显微镜观察细胞形态学;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）标记流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平;实时定量逆转录聚合酶链反应（RQ-RT-PCR）检测抗凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax与caspase-3的表达。结果:与对照组比较,除0.25、0.5 umol/L低浓度AS2O3对SKM-1细胞无明显增殖抑制及促凋亡作用（Ρ>0.05）,2、8、32 umol/L AS2O3对SKM-1细胞具有明显增殖抑制及促凋亡作用,且随着AS2O3浓度增加及作用时间延长对SKM-1细胞增殖抑制作用逐渐增加（Ρ<0.01）,凋亡发生率逐渐增加（Ρ<0.01）,显微镜观察下可见部分细胞的染色质浓缩、边缘化、核固缩、核碎裂、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态;随着AS2O3浓度增加及作用时间延长细胞内ROS水平逐渐增加（Ρ<0.01）,促凋亡基因Bax、caspase-3-m RNA表达水平逐渐增加（Ρ<0.01,Ρ<0.05）,而抗凋亡基因Bcl-2-m RNA表达水平逐渐下降（Ρ<0.01）。结论:低浓度AS2O3（0.25、0.5 umol/L）对SKM-1细胞无明显增殖抑制及促凋亡作用,而2、8、32 umol/L AS2O3对SKM-1细胞具有明显增殖抑制及促凋亡作用,具有剂量与时间依赖性,可能通过增加细胞内ROS、下调抗凋亡基因Bcl-2与上调促凋亡基因Bax、caspase-3来发挥细胞增殖抑制及促凋亡作用。第二部分雷公藤内酯醇诱导骨髓增生异常综合征SKM-1细胞凋亡及其作用机制研究目的:探讨雷公藤内酯醇（triptolide）诱导骨髓增生异常综合征（MDS）SKM-1细胞凋亡及其作用机制。方法:将不同浓度的triptolide与SKM-1细胞共育24小时与48小时,采用光学显微镜观察细胞形态学;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）标记流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平;实时定量逆转录聚合酶链反应（RQ-RT-PCR）检测抗凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax与caspase-3的表达。结果:与对照组比较,除10、20ng/ml低浓度triptolide对SKM-1细胞无明显增殖抑制及促凋亡作用（Ρ>0.05）,40、80、160ng/ml triptolide对SKM-1细胞具有明显增殖抑制及促凋亡作用,且随着triptolide浓度增加及作用时间延长对SKM-1细胞增殖抑制作用逐渐增加（Ρ<0.01）,凋亡发生率逐渐增加（Ρ<0.01）,显微镜观察下可见部分细胞的染色质浓缩、边缘化、核固缩、核碎裂、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态;随着triptolide浓度增加及作用时间延长细胞内ROS水平逐渐增加（Ρ<0.01）,促凋亡基因Bax、caspase-3-m RNA表达水平逐渐增加（Ρ<0.01）,而抗凋亡基因Bcl-2-m RNA表达水平逐渐下降（Ρ<0.01）。结论:低浓度triptolide（10、20ng/ml）对SKM-1细胞无明显增殖抑制及促凋亡作用,而40、80、160ng/ml triptolide对SKM-1细胞具有明显增殖抑制及促凋亡作用,具有剂量与时间依赖性,可能通过增加细胞内ROS、下调抗凋亡基因Bcl-2与上调促凋亡基因Bax、caspase-3来发挥细胞增殖抑制及促凋亡作用。第三部分三氧化二砷联合雷公藤内酯醇协同诱导骨髓增生异常综合征SKM-1细胞凋亡及其作用机制研究目的:探讨三氧化二砷（AS2O3）联合雷公藤内酯醇（triptolide）协同诱导骨髓增生异常综合征（MDS）SKM-1细胞凋亡及其作用机制。方法:将不同浓度单药AS2O3、triptolide或两药联合与SKM-1细胞共育48h,采用光学显微镜观察细胞形态学;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制作用,计算协同指数（Combination index,CI）;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡,计算CI;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）标记流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平,计算CI;实时定量逆转录聚合酶链反应（RQ-RT-PCR）检测抗凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax与caspase-3的表达,计算CI。结果:除0.25umol/L AS2O3+10ng/ml triptolide低浓度两药联合组对SKM-1细胞无明显增殖抑制及促凋亡作用（Ρ>0.05）,其余两药联合组比单药AS2O3或triptolide有明显抑制SKM-1细胞增殖及促凋亡作用,且随着联合两药浓度增加对SKM-1细胞增殖抑制作用逐渐增加（Ρ<0.01）,CI<1,凋亡发生率逐渐增加（Ρ<0.01）,CI<1。显微镜观察下可见部分细胞染色质浓缩、边缘化、核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型凋亡形态。随着两药联合组浓度增加细胞内ROS水平逐渐增加（Ρ<0.01）,CI<1,促凋亡基因Bax-m RNA、caspase-3-m RNA表达水平逐渐增加（Ρ<0.01）,CI<1,而抗凋亡基因Bcl-2-m RNA表达水平逐渐下降（Ρ<0.01）,CI<1。结论:三氧化二砷联合雷公藤内酯醇对SKM-1细胞有明显增殖抑制及促凋亡作用,且二者具有协同作用。其作用机制可能通过增加细胞内ROS、下调抗凋亡基因Bcl-2与上调促凋亡基因Bax、caspase-3来发挥细胞增殖抑制及促凋亡作用。